摘要:1️⃣ 细菌:24h内变黄+浑浊,镜下“细沙”游动⚡2️⃣ 真菌:3天漂浮“小霉岛”,菌丝像“树枝”3️⃣ 霉菌:絮状+细丝,孢子随风飘,一台传全军4️⃣ 支原体:0浑浊!只掉转染效率,Hoechst秒现荧光点5️⃣ 黑胶虫:黑点布朗运动,抗生素=给它挠痒6️
养细胞最怕啥?不是没结果,而是——一夜醒来,培养基成了“细菌汤”!
污染现场“刑侦照片”
1️⃣ 细菌:24h内变黄+浑浊,镜下“细沙”游动⚡
2️⃣ 真菌:3天漂浮“小霉岛”,菌丝像“树枝”
3️⃣ 霉菌:絮状+细丝,孢子随风飘,一台传全军
4️⃣ 支原体:0浑浊!只掉转染效率,Hoechst秒现荧光点
5️⃣ 黑胶虫:黑点布朗运动,抗生素=给它挠痒
6️⃣ 原虫:与细胞抢营养,核内空泡像“瑞士奶酪”
7️⃣ 非同种细胞:HeLa偷偷混入,STR一测直接“换爹”
⚡ 抢救or丢弃?3秒决
细菌轻度→四环素50μg/mL冲击48h,重度→整盘丢!真菌/霉菌→直接丢+全面酒精+硫酸铜水盘,孢子杀不净!支原体→BM-Cyclin 14天套餐,PCR仍阳性?种子库重提!黑胶虫→高密度+专用清除剂,2代还乱爬?消毒桶伺候!⚠️一句话:普通细胞>2周抢救=浪费时间,立刻重种更香!
️ 预防军规12条(照抄就能0污染)
① 超净台内“手套+口罩+蝴蝶袖”,手臂绝不越线!
② 枪头、试剂专细胞专用,贴色标+日期,杜绝HeLa“卧底”。
③ 每月1次支原体PCR,季度STR“验明正身”,细胞也查身份证。
④ 培养箱水盘每周换水+0.2%硫酸铜,真菌想长都难!
⑤ 血清56℃30min灭活+0.1μm过滤,黑胶虫率↓80%。
⑥ 新细胞隔离7天阴性再入库,防止“带病入职”。
⑦ 不同细胞分盘操作,中间空1台超净台,避免交叉 splash。
⑧ 操作完立刻75%酒精环形擦,擦到台面积液“吱吱”响。
⑨ 培养基只预热到37℃,不反复水浴,减少营养降解。
⑩ 实验记录写清批次+传代数+操作人,污染秒溯源。
⑪ 实验室湿度,空调滤芯季度换,霉菌孢子进不来。
⑫ 组会前5min污染案例分享,把“倒霉经历”升级成全组财富!
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来源:毕合生物MBC