「期刊导读」CD300A+ CD8+ T细胞：预测聚乙二醇干扰素α治疗慢乙肝患者临床治愈的新型生物标志物

摘要：随着研究的深入，准确识别对聚乙二醇干扰素α（PEG IFNα）治疗有应答的患者对于优化临床治疗策略至关重要。既往研究表明，宿主遗传因素和病毒学标志物如基线HBsAg（相关链接）、HBV RNA（相关链接）和HBcrAg（相关链接）水平及早期动态变化均有助于预测

随着研究的深入，准确识别对聚乙二醇干扰素α（PEG IFNα）治疗有应答的患者对于优化临床治疗策略至关重要。既往研究表明，宿主遗传因素和病毒学标志物如基线HBsAg（相关链接）、HBV RNA（相关链接）和HBcrAg（相关链接）水平及早期动态变化均有助于预测慢乙肝患者接受PEG IFNα治疗的疗效。此外，已有多项研究表明，（PEG）IFNα作为免疫调节剂对免疫系统具有广泛作用，涉及多种免疫细胞和趋化因子，包括T细胞、B细胞、NK细胞等（相关链接一、二、三），患者经PEG IFNα治疗获得临床治愈后肝脏免疫环境显著改变，肝脏内的NK细胞处于免疫激活状态，肝内髓细胞环境重塑为免疫激活状态（相关链接）。

近期，解放军总医院第五医学中心的王福生院士、福军亮教授和张超教授团队通过对CD8 T细胞亚群的综合分析发现，在基于PEG IFNα治疗获得临床治愈的患者中CD8+ T细胞显著高表达CD300A，基线时CD300A+ CD8+ T细胞频率较高与治疗过程中血清HBsAg快速下降和临床治愈相关，且不受基线HBsAg水平的影响，提示CD300A+ CD8+ T细胞或是预测PEG IFNα治疗应答的有效生物标志物。

研究方法

本研究将纳入的慢乙肝患者分为发现队列和验证队列：

发现队列：纳入2019年10月30日至2020年7月23日期间核苷（酸）类似物经治且血清HBsAg

验证队列：是一个纵向研究组，旨在验证发现队列的研究结果。入组2022年8月10日至2024年7月20日期间，血清HBsAg

研究结果

01临床治愈患者的CD8终末效应记忆/效应T细胞呈显著克隆扩增将CD8 T细胞分为6个亚群：c01_Tn（初始T细胞）、c02_Tcm（中央记忆T细胞）、c03_Tem（效应记忆T细胞）、c04_Temra/Teff（终末效应记忆T细胞或效应T细胞）、c05（KIR+ T细胞）和c06（增殖性T细胞）。在发现队列中，与非临床治愈患者相比，临床治愈患者的c04和c06亚群呈显著克隆扩增，尤其是c04亚群在临床治愈患者中的富集最为明显，表明实现临床治愈的慢乙肝患者在PEG IFNα治疗期间表现出独特的CD8+ T细胞免疫特征。接受PEG IFNα治疗后各组慢乙肝患者外周血中CD8+ T细胞的单细胞转录组分析结果（部分截图）。（E）三组患者中CD8+ T细胞亚群的比例（功能治愈组中c04亚群比例最高）；（G）每例患者/对照者中CD8+ T细胞亚群的比例02临床治愈患者的CD300A CD8+ T细胞呈显著富集，且高表达细胞毒性分子既往研究表明，CD300受体家族是一类Ⅰ型跨膜蛋白，CD300A是CD300受体家族中的一种抑制性受体，或与感染性疾病的免疫调节相关。本研究发现，与非临床治愈患者相比，临床治愈患者CD300A的表达均显著升高，尤其是在c02、c03、c04和c06亚群中，并且以CD8T_c04为主。此外，CD300A CD8+ T细胞表达更高水平的细胞毒性分子，如颗粒溶素（GNLY）、颗粒酶B（GZMB）和穿孔素1（PRF1），这些上调的因子与淋巴细胞活化、适应性免疫反应和白细胞介导的细胞毒性有关，表明CD300A可能参与调控CD8+ T细胞的细胞毒性效应，进而影响病毒清除效率。03CD300A CD8+ T细胞表现出更强的克隆扩增和抗原应答能力，显著富集HBV特异性CD8+研究进一步发现，CD300A+ CD8+ T细胞表现出更强的克隆扩增能力和抗原反应能力，激活由T-框蛋白21（TBX21，在调控炎症和免疫应答中发挥重要作用）和脱中胚蛋白（EOMES，与CD8+ T细胞分化和效应功能密切相关）驱动的转录网络，显著富集HBV特异性CD8+ T细胞。克隆扩增能力增加使其在病毒刺激下可大量增殖以强化免疫应答；抗原应答能力增强有助于更高效地识别病毒抗原，在关键转录因子TBX21和EOMES的作用下，调控下游基因（如GZMB、PRF1）维持细胞的效应功能；而富集的HBV特异性CD8+ T细胞可精准识别并清除乙肝病毒感染细胞，有利于实现临床治愈。04基线时CD300A+ CD8+ T细胞频率较高有助于更快实现临床治愈纵向验证结果与单细胞测序数据一致，与CD300A- CD8+ T细胞相比，CD300A+ CD8+ T细胞中高表达细胞毒性基因（如GZMB、GNLY和PRF1）的细胞比例显著更高，且主要集中于记忆T细胞亚群。临床治愈组的基线CD300A+ CD8+ T细胞频率显著高于非临床治愈组，且在整个治疗过程中保持高水平，表明CD300A的表达可能提示患者存在预先的免疫应答能力，而不仅仅是由PEG IFNα治疗诱导获得。基线时CD300A CD8+ T细胞频率较高与更大的HBsAg下降幅度相关CD300A CD8+ T细胞频率与实现临床治愈的时间呈显著负相关（R = -0.82, p = 0.045），即CD300A+ CD8+细胞频率较高有助于更快实现临床治愈，且不受基线HBsAg水平的影响（R = 0.047, p = 0.9），提示CD300A+ CD8+ T细胞或是预测PEG IFNα疗效的潜在生物标志物。

基线CD300A+细胞频率与基线HBsAg水平（左上）、12周时的HBsAg降幅（右上）、24周时的HBsAg降幅（左下）以及获得临床治愈的时间（右下）的关系 undefined

肝霖君有话说本研究表明，CD300A+ CD8+ T细胞（尤其Tcm亚群）通过高表达细胞毒性效应分子（GZMB、GNLY、PRF1）和富集HBV特异性T细胞，直接介导病毒清除，从免疫学层面解释了PEG IFNα的治愈机制。同时，CD300A+ CD8+ T细胞频率与HBsAg清除速率和临床治愈时间显著相关，且独立于基线HBsAg水平，表明CD300A+ CD8+ T细胞是一种预测PEG IFNα疗效的新型免疫标志物。该指标可通过流式细胞术检测外周血CD300A表达，在临床中更易实现，有助于指导个体化治疗方案的优化。但未来仍需扩大样本，进一步探索该指标的应用潜力。参考文献：

Zhang P, Wang WX, Li J, et al. CD300A+ CD8+ T Cells as Predictive Biomarkers for Achieving Functional Cure in Chronic Hepatitis B Patients Undergoing Pegylated Interferon-Alpha Therapy[J]. Aliment Pharmacol Ther. 2025, 62(5): 512-525.