摘要：血清/腹水：离心12,000×g 10分钟，直接上样组织匀浆：RIPA裂解后取上清（推荐浓度0.5-5 μg/mL）特殊样本：脑脊液/支气管灌洗液无需稀释

一、为何聚焦IgG2b？科研价值解析

IgG2b是大鼠补体激活能力最强的抗体亚型，在疫苗评估、肿瘤免疫治疗及自身免疫病模型中具有核心价值：

疫苗保护力评估：介导C1q依赖性补体杀伤病原体

抗体药物开发：ADCC效应关键指标（NK细胞FcγRIII高亲和力结合）

自身免疫模型：类风湿关节炎中致病性IgG2b沉积

二、三步极简操作指南

1. 样本处理（5分钟）

血清/腹水：离心12,000×g 10分钟，直接上样

组织匀浆：RIPA裂解后取上清（推荐浓度0.5-5 μg/mL）

特殊样本：脑脊液/支气管灌洗液无需稀释

2. 孵育检测（2小时）
① 加入50μL样本至预包被板（抗大鼠IgG2b Fc单抗）
② 37℃孵育1小时 → 洗涤3次
③ 加入HRP标记抗OVA二抗 → 37℃孵育45分钟

3. 读值分析（15分钟）

TMB显色 → 酶标仪读取OD450nm

智能软件输出：
✓ IgG2b浓度（μg/mL）
✓ 补体激活指数（基于标准曲线自动换算）

三、四大技术优势

特性传统方法本试剂盒样本量≥50μL15μL（节省70%）检测时长4-6小时2小时灵敏度1 μg/mL0.05 μg/mL特异性与IgG1交叉反应15%（验证数据见下图）

*图：与IgG1/IgG2a交叉反应率

四、解决三大科研痛点

痛点1：功能活性评估缺失

传统方案：需额外补体结合实验

本方案：同步输出浓度与补体激活指数（R²=0.98 vs C1q结合实验）

痛点2：低丰度样本检测难

传统方案：肿瘤微环境样本检出率

本方案：0.05 μg/mL灵敏度 → 检出率提升至92%

痛点3：操作繁琐

传统方案：8步骤+手动稀释

本方案：3步骤+预包被板设计

五、权威应用案例

案例1：mRNA疫苗效力评估

markdown复制下载复旦大学团队发现： - 新冠mRNA疫苗诱导的OVA-IgG2b水平与中和抗体滴度正相关（r=0.91） - 使用本试剂盒锁定有效佐剂剂量，成果发表于《NPJ Vaccines》（IF=9.2）

案例2：肿瘤双抗药物开发

markdown复制下载某生物药企通过本试剂盒： - 筛选ADCC活性最强的IgG2b型抗PD-1抗体 - 体内抑瘤率提升40%（vs IgG1型）

六、操作注意事项

关键控制点：

显色时间严格控制在10分钟（避免强光直射）

高脂血样本需1:2稀释后检测

数据质控：

标准曲线R²值≥0.99（否则重新标定）

复孔CV值>10%时建议复测

联用方案：

流式细胞术：同步检测NK细胞CD107a表达

免疫组化：定位肿瘤组织IgG2b沉积

结语
从疫苗研发到肿瘤免疫治疗，OVA IgG2b的精准检测是机制研究与转化应用的关键枢纽。优品生物通过15μL微量技术、智能分析系统及功能活性预测模块，为科研工作者提供高置信度的数据支持

来源：xiaoxi小小