LysoBright 溶酶体荧光探针, 荧光染料在科研领域中的优势

B站影视 韩国电影 2025-09-23 16:47 2

摘要:LysoBright溶酶体荧光探针 是一种用于活细胞溶酶体特异性标记的荧光探针,本品浓度为 1 mM。LysoBright溶酶体荧光探针可以选择性地滞留在偏酸性的溶酶体中,从而实现对于溶酶体的特异性荧光标记。LysoBright溶酶体荧光探针适用于活细胞染色但

LysoBright溶酶体荧光探针 是一种用于活细胞溶酶体特异性标记的荧光探针,本品浓度为 1 mM。LysoBright溶酶体荧光探针可以选择性地滞留在偏酸性的溶酶体中,从而实现对于溶酶体的特异性荧光标记。LysoBright溶酶体荧光探针适用于活细胞染色但不适合用于固定后细胞的染色。

荧光特性优越:具有高信噪比,光稳定性强,进入溶酶体后荧光会显著增强,能够提供清晰、稳定的荧光信号,有利于进行长时间的观察和成像。细胞适用性广泛:适用于增殖与非增殖细胞,以及悬浮细胞和贴壁细胞等多种类型的细胞,可满足不同实验对细胞类型的需求。特异性强:利用溶酶体的 pH 梯度,能够选择性地积聚在溶酶体中,实现对溶酶体的特异性染色,减少对其他细胞器的非特异性标记,从而更准确地研究溶酶体的功能和特性。细胞毒性低:其分子设计考虑了对细胞的影响,如LysoBright 溶酶体荧光探针(绿色) 等探针,不会对细胞造成明显的损伤,避免干扰细胞的正常生理功能,适合用于活细胞的实时成像分析。染色操作简便:部分探针如 LysoBright 溶酶体荧光探针(绿色) 染色过程简便,无需固定或洗涤步骤,可直接对活细胞进行染色,节省了实验时间和操作步骤。可提供多种颜色选择:Medlife 提供了 7 种不同颜色的溶酶体荧光染色方案,方便研究人员进行多色荧光标记实验,能够同时对多个目标进行标记和观察,便于研究不同细胞结构或分子之间的关系。

一、溶酶体基础功能与动态变化研究

这是探针最核心的应用场景,主要聚焦溶酶体自身的生理状态与行为分析,为理解细胞代谢机制提供直接证据:

溶酶体定位与形态观察:通过特异性荧光标记,清晰显示活细胞内溶酶体的空间分布(如是否集中于细胞核周围或细胞质边缘)、数量变化(如细胞应激时溶酶体是否增殖)及形态特征(如正常状态下的球形、异常时的肿胀或碎片化),助力判断溶酶体结构完整性。溶酶体动态追踪:利用其良好的光稳定性,支持长时间(如几小时至数十小时)实时成像,观察溶酶体在细胞内的运动轨迹(如沿细胞骨架的运输)、融合与分裂过程(如与内体、自噬体的融合事件),揭示溶酶体的动态调控机制。溶酶体 pH 值监测:溶酶体功能依赖酸性环境(正常 pH 4.5-5.5),LysoBright 探针的荧光强度会随 pH 变化而改变(酸性条件下荧光增强),可通过荧光信号定量分析溶酶体 pH 异常(如 pH 升高导致的功能紊乱),常用于研究细胞器酸化机制或病理状态下的溶酶体功能异常。

二、自噬相关研究

自噬是细胞通过 “自噬体 - 溶酶体融合” 降解受损成分的过程,溶酶体是自噬的关键 “降解场所”,LysoBright 探针可辅助解析自噬的完整通路:

自噬流监测:通过标记溶酶体,结合自噬标志物(如 LC3)的荧光共定位,观察自噬体与溶酶体的融合效率 —— 若融合正常,自噬流通畅,探针标记的溶酶体与 LC3 阳性自噬体会形成共定位信号;若融合受阻(自噬流停滞),共定位信号减少,且溶酶体形态可能出现异常(如肿胀)。自噬相关疾病机制研究:在自噬紊乱相关疾病(如神经退行性疾病、癌症)的细胞模型中,用探针观察溶酶体功能(如 pH、降解能力)与自噬的关联,例如阿尔茨海默病中,溶酶体酸性降低可能导致自噬降解障碍,进而引发淀粉样蛋白沉积,探针可直观呈现这一病理过程中的溶酶体异常。

三、细胞凋亡与应激响应研究

溶酶体功能异常是细胞凋亡(程序性死亡)或应激响应的重要触发因素,LysoBright 探针可用于监测这一关联过程:

凋亡中的溶酶体变化:细胞凋亡早期可能出现 “溶酶体膜通透化(LMP)”,导致溶酶体内水解酶释放到细胞质,引发后续凋亡反应。此时 LysoBright 探针的荧光信号会从 “点状(溶酶体定位)” 扩散为 “弥散状(细胞质分布)”,可作为 LMP 及凋亡早期的可视化指标。应激条件下的溶酶体适应性:当细胞面临营养缺乏、氧化应激、药物处理等外界刺激时,溶酶体功能会发生适应性调整(如增殖、酸化增强以提升降解能力)。用探针可观察应激后溶酶体的数量、形态及 pH 变化,分析细胞的应激适应机制。

四、疾病机制与病理研究

LysoBright 探针可作为 “溶酶体功能异常” 的可视化工具,助力解析多种疾病的病理机制,尤其适用于以下领域:

神经退行性疾病:如帕金森病(α- 突触核蛋白聚集)、亨廷顿病(亨廷顿蛋白聚集),此类疾病中溶酶体降解功能下降是蛋白异常聚集的重要原因。探针可用于观察患者来源细胞(如诱导多能干细胞分化的神经元)中溶酶体的形态、pH 及与异常蛋白的共定位,揭示疾病的细胞层面机制。癌症研究:肿瘤细胞的溶酶体通常更活跃(以满足快速增殖的营养需求),且部分化疗药物(如阿霉素)会通过破坏溶酶体诱导肿瘤细胞死亡。用探针可对比正常细胞与肿瘤细胞的溶酶体差异,或评估化疗药物对肿瘤细胞溶酶体的损伤效果,为癌症治疗靶点筛选提供依据。溶酶体贮积症研究:这是一类因溶酶体酶缺陷导致底物堆积的遗传病(如戈谢病、尼曼 - 匹克病),患者细胞内溶酶体会因底物堆积而肿胀、数量增多。LysoBright 探针可清晰标记异常增大的溶酶体,辅助疾病诊断(如细胞水平的表型观察)及治疗效果评估(如酶替代疗法后溶酶体形态是否恢复正常)。

五、药物研发与筛选

在药物开发中,LysoBright 探针可作为 “溶酶体靶向药物” 或 “影响溶酶体功能药物” 的筛选与评估工具:

溶酶体靶向药物的定位验证:部分药物(如用于溶酶体贮积症的酶替代药物、癌症的溶酶体靶向化疗药)需精准递送至溶酶体才能发挥作用。用 LysoBright 探针与药物(荧光标记)共孵育,通过共定位信号验证药物是否成功进入溶酶体,评估药物递送效率。药物对溶酶体功能的影响筛选:筛选可能调节溶酶体功能的候选药物(如促进溶酶体降解、恢复酸性环境的药物),通过探针检测药物处理后溶酶体的 pH、形态、荧光强度变化,快速判断药物对溶酶体的作用(如是否提升溶酶体酸化能力),为自噬相关疾病、神经退行性疾病的药物研发提供筛选依据。

六、多色荧光共定位与高分辨率成像

LysoBright 探针提供多种荧光颜色(如绿色、红色、远红色),可与其他细胞器探针(如线粒体探针 MitoTracker、内质网探针 ER-Tracker)或分子标志物(如抗体标记的蛋白)进行多色共定位实验,解析溶酶体与其他细胞结构的相互作用:

例如,通过 “LysoBright(溶酶体,红色)+ MitoTracker(线粒体,绿色)” 共定位,观察细胞应激时溶酶体与线粒体的 “线粒体自噬(mitophagy)” 过程;结合共聚焦显微镜、超高分辨率显微镜(如 STED),可实现溶酶体亚结构(如溶酶体膜、内部腔室)的高分辨率成像,深入研究溶酶体的精细结构与功能关联。

来源:科学快车

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