摘要:尽管低盐度对虾养殖技术已经成功实现,并迅速传播,但据报道,低盐度水系中的虾养殖仍然面临单位面积产量较低等问题的挑战。这些与低盐度条件引起的渗透胁迫密切相关;因此,需要更好地阐明低盐胁迫下虾的渗透调节机制。然后,开发营养调节方法,提高对虾淡水养殖的渗透调节能力和
尽管低盐度对虾养殖技术已经成功实现,并迅速传播,但据报道,低盐度水系中的虾养殖仍然面临单位面积产量较低等问题的挑战。这些与低盐度条件引起的渗透胁迫密切相关;因此,需要更好地阐明低盐胁迫下虾的渗透调节机制。然后,开发营养调节方法,提高对虾淡水养殖的渗透调节能力和产量。
南美白对虾(Litopenaeus vannamei)是一种典型的盐碱类(能够适应多种盐度)甲壳类动物,表现出强大的通过渗透调节适应不同盐度的水环境的能力,这有利于其广泛的地理分布。在海水中,甲壳类动物充当渗透压构态(使其体液与周围水的渗透压相匹配的生物体),其血淋巴的渗透压直接反映外部环境的渗透压。如果水盐度降至26ppt以下,这种虾将激活各种高渗调节机制,这些机制依赖于一组离子运输载体和酶。
对南美白对虾的早期研究报告称,当盐度为29-30ppt时,最佳牛磺酸水平为饲料的0.168%,但其他作者报告称,当盐度为0.437-0.579ppt时为0.57-0.60%,为0.57-6.0%。因此,虾需要大量的能量和渗透液来适应低盐度条件下的渗透变化,从而明显改变其营养需求,这是可以理解的。低盐度条件下牛磺酸在不同生育期对虾的渗透调节功能有待进一步研究。
本文 – 总结自(Wang, H. et al. 2025)补充牛磺酸,可增强南美白对虾幼苗对低盐度胁迫的抵抗力。
一、研究设置:
本研究将大小均匀的同一养殖批次(盐度为18ppt)的健康南美白对虾虾苗(PL),在室内实验池中用不同盐度的水体养殖,分为3组:对照组(C,18ppt)、低盐度组(L,盐度从18ppt逐渐降低到4ppt,盐度下降速度为2ppt/天), 低盐度+牛磺酸组(T,盐度与L组相似)。
以商品虾饲料为基础饲料,喂养C组和L组的虾苗。T组的实验饲料是将牛磺酸溶解在水中,然后喷洒在基础颗粒饲料(占干饲料重量的0.3%)上。每个实验组有三个水箱,每个实验水箱中有300尾虾苗。水温、溶解氧和pH值分别保持在29±1°C、7.1±0.4 mg/L和7.4±0.6的范围内。
在为期一周的试验结束时,收集虾苗以计算存活率和体长。并且,一些虾苗样品储存,以备后续分析。
二、结果与讨论:
1、南美白对虾可以生活并在咸水和淡水中进行养殖,因为它能够适应不同的盐度水平。在对虾养殖中,暴雨和水体蒸发会导致池塘盐度的变化,这通常会影响虾的性能。虾对盐度的耐受性取决于多种因素,例如:它们的生长阶段以及它们暴露于盐度变化的速度。虽然许多研究都集中在成年虾上,但对它们的早期阶段知之甚少。这项研究着眼于低盐度胁迫下和补充牛磺酸后的虾苗,评估存活率、生长、组织学、酶活性和其他反应。
结果表明,饲料中添加牛磺酸在低盐胁迫下可明显提高虾苗的存活率,并有助于修复组织损伤。盐度是影响养殖对虾生理机能和生长的最重要因素之一。通过逐渐但快速的变化发生的低盐度暴露,会明显影响虾苗和成虾的耐盐性。在我们的研究中,为了模拟极端盐度环境,实验性低盐度胁迫(L)虾组的水体盐度在7天内从18 ppt降低到4ppt。
如图1所示,L组对虾PL的存活率下降到61.11%,而对照组为92.67%,表明这些动物在盐度快速变化中挣扎。此前的研究发现,暴露于盐度从30ppt突然下降到0.3ppt 的虾的存活率仅为11.91%,而适应较为缓慢的虾的存活率为 86.67%,仍低于该研究中的对照组。
图1:在盐水、低盐水和低盐水+牛磺酸补充下饲养的虾苗的成活率(A)和体长(B)。
2、为了研究对虾在低盐度条件下虾苗性能的改善,在它们的饲料中添加了牛磺酸。众所周知,牛磺酸可以提高某些酶的活性,改善动物生长和饲料效率。各种研究报道称,补充牛磺酸可以帮助虾生长得更好,尤其是在低盐度的水中。在这项研究中,牛磺酸明显提高了虾苗在应激下的存活率,并导致更好的身体生长。此外,与低盐度组相比,它有助于恢复肌肉纤维和器官结构。总体而言,牛磺酸可以减少因暴露于极低盐度而造成的组织损伤,并促进动物的生长。我们研究中的组织学检查显示了显着差异,与观察到的完整组织形态相比,L组表现出较差的组织组织和一些结构性组织损伤。
图2:在盐水、低盐水体养殖虾苗,在饲料补充牛磺酸的合并组织学结构。表示肌间空间;表示内脏器官之间的分界线。比例尺:500微米。
3、牛磺酸通过调节酶Na+/K+-ATP酶(NKA) 在帮助虾在低盐度环境中维持离子平衡方面发挥着关键作用。这种重要的酶被称为钠钾泵,存在于所有动物细胞的膜中,在细胞生理学中发挥着多项关键功能。当虾经历低盐度胁迫时,我们观察到NKA蛋白的表达和活性增加,表明虾正在适应环境的变化。这与之前的研究表明,在将虾移至低盐度水后,虾中的NKAα亚基mRNA水平发生变化。另外,周围介质中的不平衡离子也会促进NKA泵的活性,有助于平衡渗透压。
此外,NKA活性和表达受到营养素的影响,研究人员报告说,高不饱和脂肪酸 (HUFA) 含量高的饲料会降低暴露于盐度后虾的NKA活性。此外,当在虾的饲料中加入牛磺酸时,可以对抗低盐度压力并比补充钾更能促进生长。此外,补充牛磺酸可将低盐度胁迫下的NKA活性降低到与淡水中相似的水平,这表明它有效地有助于渗透压调节。总体而言,牛磺酸有助于虾适应低盐度条件,这对于在这些条件下养殖时的生存和生长非常重要。
4、在这项研究中,进行了转录组学分析(转录组学是对转录组的综合研究——细胞中存在的所有基因读数的集合——包括生物体内发现的所有核糖核酸、RNA、分子)以了解虾如何适应低盐度胁迫,结果显示737个基因受到影响,其中454个基因上调(打开),283 个基因下调(关闭)。在暴露于低盐度的虾中,某些生物活性(例如激素相关功能和胶原蛋白代谢)增加,表明对渗透调节有反应。结果还表明,低盐度抑制了促进细胞生长和氧气运输的各种生理途径,导致暴露的虾的存活率降低。
我们还观察到,当饲料添加牛磺酸时,它明显影响基因表达,其中497个基因上调,437个基因下调。结果还表明,牛磺酸降低了参与激素活性和受体信号传导的基因的表达,表明其作为渗透调节剂和抗氧化剂的作用。牛磺酸似乎还可以降低虾对环境变化的敏感性,促进它们的生存率。此外,牛磺酸促进受控细胞增殖并影响Wnt信号通路——在胚胎发育过程中调节细胞命运决定、细胞迁移、神经模式和器官发生的关键方面的古老途径——可能有助于修复虾的鳃或肠道组织。
5、结果还表明,饲料添加牛磺酸增强了渗透调节蛋白活性,激活了与碳水化合物、氨基酸和维生素相关的各种代谢途径,有助于虾适应低盐环境。此外,虽然类固醇激素的产生在低盐度下增加,但牛磺酸似乎降低了这种产生,支持了其缓解压力的特性。
总体而言,在比较补充和不补充牛磺酸饲料的低盐度虾苗时,补充牛磺酸导致529个差异表达基因,显示出与压力相关的基因变化减少,并证明牛磺酸在减轻低盐度压力方面大有好处。此外,牛磺酸对发育和神经源性途径产生积极影响,同时抑制细胞死亡指标, 有可能在低盐度胁迫条件下保持虾的细胞健康。
三、研究观点:
在这项研究中,低盐度胁迫明显限制了南美白对虾虾苗的存活率,并引起组织学改变,诱导NKA过度激活,并差异调控基因表达。牛磺酸可以作为渗透剂,有效减轻低盐度胁迫引起的损伤,同时促进虾苗的上皮细胞增殖。
来源:一号水产