摘要:近日,Nature reviewsmolecular cell biology在线发表马里兰大学戚益平团队题为“CRISPR–Cas applications in agriculture and plant research”的综述论文,该研究系统综述了CR
近日,Nature reviews molecular cell biology在线发表马里兰大学戚益平团队题为“CRISPR–Cas applications in agriculture and plant research”的综述论文,该研究系统综述了CRISPR-Cas在农业和植物研究中的应用和进展。
1.1 研究背景
全球人口增长与气候变化对农业的挑战
传统育种技术的局限性
CRISPR–Cas技术带来的革命性突破
1.2 文章目的
综述CRISPR–Cas工具箱的扩展与优化
探讨其在植物基因组编辑中的多样化应用
2.1 核心蛋白的多样化
Cas9变体:SpCas9-VQR、SpCas9-EQR(扩展PAM范围)
Cas12家族:Cas12a(Cpf1)、Cas12b、Cas12i(高编辑效率与紧凑性)
超紧凑系统:CasΦ(12j2)、Cas12f(适用于病毒递送)
2.2 编辑工具的升级
双链断裂(DSB)依赖型工具:传统Cas蛋白的优化
非DSB依赖型工具:碱基编辑器(Base Editor)、Prime编辑器。
3.1 HDR介导的基因靶向
挑战:植物中HDR效率低
优化策略:同步递送修复模板、调控细胞周期
3.2 碱基编辑(Base Editing)
原理:dCas9/nCas9融合脱氨酶(C→T或A→G替换)
应用:单核苷酸多态性(SNP)精准修正
3.3 Prime编辑
原理:逆转录酶与nCas9融合,直接写入新序列
优势:无需DSB,可插入、删除或替换长片段
4.1 表观遗传编辑
DNA甲基化:dCas9融合甲基转移酶/去甲基化酶
组蛋白修饰:dCas9融合乙酰化酶/去乙酰化酶
4.2 转录调控工具
CRISPRa(激活):dCas9-VP64/p65融合增强基因表达
CRISPRi(抑制):dCas9-KRAB融合抑制基因表达
5. 编辑剂的递送方法5.1 传统递送技术
农杆菌介导转化、基因枪法、原生质体转化
5.2 新兴递送策略
病毒诱导系统:如Bean Yellow Dwarf Virus(BeYDV)载体
无组织培养法:嫁接传递、剪浸芽接法(Cut–Dip–Budding, CDB)
纳米材料递送:脂质体或聚合物包裹编辑剂
6.1 高产性状工程
启动子编辑:调控基因表达水平(如水稻GW5基因编辑提高粒重)
非翻译区(UTR)编辑:优化mRNA稳定性与翻译效率
6.2 抗逆性增强
耐旱性(水稻OsNAC041、玉米ARGOS8编辑)
抗病性(编辑SWEET基因抗白叶枯病)
6.3 快速驯化新作物
案例:野生番茄关键基因(SP、SP5G等)编辑实现快速驯化
7.1 技术成就
工具箱的多样化与精准化(从DSB到表观调控)
递送方法的创新(突破组织培养限制)
7.2 应用潜力
推动高产、抗逆、营养强化作物的商业化
助力新作物驯化与可持续农业发展
7.3 挑战与方向
提升编辑效率与特异性(脱靶效应控制)
开发更高效递送系统(如病毒载体优化)
法规与公众接受度的平衡
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来源:科学黑与白