摘要:在实验室打拼的你,肯定遇到过这种魔幻时刻:前一天还在显微镜下倍精神的细胞,今天一瞅就跟被抽走了元气似的蔫巴巴!这根本是会伪装的「亚健康」细胞,坑得实验数据忽高忽低像坐过山车!因此,要想做好细胞实验,准确高效地检测细胞增殖率与数量非常重要。
在实验室打拼的你,肯定遇到过这种魔幻时刻:前一天还在显微镜下倍精神的细胞,今天一瞅就跟被抽走了元气似的蔫巴巴!这根本是会伪装的「亚健康」细胞,坑得实验数据忽高忽低像坐过山车!因此,要想做好细胞实验,准确高效地检测细胞增殖率与数量非常重要。
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4 大技巧让细胞活力 UP UP
一、优化细胞培养条件
• 根据细胞类型匹配专用培养基,确保培养基营养充足。
• 维持 CO₂ 培养箱 90%~95% 相对湿度,避免低于 90% 导致培养基蒸发。
• 定期清洁培养箱,强化无菌操作,防止细胞污染。
二、细胞复苏、传代与冻存策略
• 复苏时 37 ℃ 水浴快速解冻(
• 贴壁细胞待汇合度达 80%~90% 时传代,避免过度融合(> 95%)导致接触抑制。
• 低增殖细胞,传代密度提高至 1 × 10⁵ cells/cm²(高密度促进存活);高增殖细胞(如 HeLa):传代密度控制在 5 × 10⁴ cells/cm²(避免过度拥挤导致接触抑制)。
• 冻存前细胞浓度需达 1~5 × 10⁶ cells/mL,活率 > 95%(活率每降低 10%,复苏后细胞活性下降 30%)。
Note:具体细胞计数及活力检测方法及选择可参考《掌握基于细胞的实验》白皮书,完成上述问卷即可下载查看。
三、避免应激损伤
• 换液操作时避免直接冲击细胞层。
• 贴壁细胞消化用胰酶浓度 0.25%, 37 ℃ 消化时间 ≤ 5 分钟,用含血清培养基终止,避免细胞损伤。
四、特殊细胞类型优化方案
如果还担心细胞「亚健康」影响实验结果?新技术来啦!梅特勒托利多推出最新CytoDirect 免染色自动细胞计数仪,直接使用细胞悬液,免染色,15 s 快速完成计数。同时,还配备了全息影像的细胞分析系统,能生成细胞专属「体检报告」:通过散点图展示每个细胞的增殖率评分,清晰明了展现细胞活力,让你做后续实验更有把握!
「亚健康」细胞
健康细胞
(细胞增殖率评分:越接近 1 分细胞越健康,越接近 0 分细胞死亡,中间的细胞处于亚健康状态)
除此之外,该细胞计数仪手持能轻松带进超净台,可以帮助大家轻松解决细胞计数难题,再也不必吃人工细胞计数的苦!
CytoDirect
免染色自动细胞计数仪
产品亮点:
超大视场实现可靠测量
CytoDirect 采用超大测量视场-比标准血球计数器大 30 倍,显著提高了单次测量的准确性。
告别台盼蓝
无需进行具有细胞毒性的染色步骤即可进行活力评估,从而提高了样品的完整性,并消除了容易出错的步骤和用户间的差异。
不受场地限制
CytoDirect 专为便携性而设计:一款坚固耐用、可充电的小型仪器,可通过 Wi-Fi 连接进行无线数据传输,可带到实验室任何地方使用,甚至放置于超净台下,并且可以消毒!
简单易用
CytoDirect 使用非常方便,无需培训。仅按照屏幕上的提示进行操作,即可轻松获得结果。借助内置的故障排除指南,可快速了解您的样品制备和工作流程是否正确。
内容审核:沈佳钰
项目审核:朱晓芳
题图来源:图虫创意
来源:健康十八点