摘要:LDHC通过调控乳酸代谢,介导TSG101的乳酸化修饰,促进其表达,加强TSG101与ESCRT-I复合物相互作用,从而激活MAPK信号通路,促进xxx细胞增殖,最终促进xxx的发生发展
今天分享一下如何使用乳酸化基因设计国自然级别课题,项目名称如下:
乳酸脱氢酶LDHC在xxx疾病发生发展中的功能与机制研究
科学假说:
LDHC通过调控乳酸代谢,介导TSG101的乳酸化修饰,促进其表达,加强TSG101与ESCRT-I复合物相互作用,从而激活MAPK信号通路,促进xxx细胞增殖,最终促进xxx的发生发展
课题内容组成部分的拆分:一、LDHC的选择与确定
二、LDHC的体内外功能研究
一、LDHC的选择与确定(筛选思路与步骤)前期工作(不用花钱):1、生信数据挖掘(差异分析)2、eQTL、pQTL分析预实验验证:3、qRT-PCR、Western blot4、过表达LDHC后促进xxx细胞的增殖二、LDHC的体内外功能研究(实验)1、细胞水平:验证 LDHC的过表达或敲低对xxx细胞增殖的影响,并且使用挽救实验验证。2、动物水平:构建动物模型,验证 LDHC的过表达或敲低对xxx增殖的影响。三、LDHC/TSG101/ ESCRT-I复合物/MAPK的分子机制研究
前期工作:探索LDHC 下游作用的靶点基因(生信分析和预实验)前期工作:探索TSG101 下游作用的信号通路(生信分析和预实验)三、LDHC/TSG101/ ESCRT-I复合物/MAPK的分子机制研究内容
1、验证LDHC通过调控乳酸代谢影响TSG101的乳酸化修饰2、验证TSG101的乳酸化是否影响其表达及功能3、验证TSG101与ESCRT-I复合物的相互作用4、验证TSG101与ESCRT-I复合物激活MAPK信号通路5、动物模型验证LDHC/TSG101/ ESCRT-I复合物/MAPK对xxx细胞增殖的影响本文只分享思路,剩下的细节问题需要自己摸索。
来源:百味科学
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