百泰派克生物科技：激酶谱

摘要：激酶谱指的是在特定细胞、组织或生物样本中，对一系列激酶的活性、表达水平、底物特异性及相互作用关系等特性进行综合描述与呈现的信息集合。激酶是一类能够催化磷酸基团从高能供体分子（如 ATP）转移到特定底物蛋白上的酶，通过调节底物蛋白的磷酸化状态，进而调控众多细胞功

激酶谱指的是在特定细胞、组织或生物样本中，对一系列激酶的活性、表达水平、底物特异性及相互作用关系等特性进行综合描述与呈现的信息集合。激酶是一类能够催化磷酸基团从高能供体分子（如 ATP）转移到特定底物蛋白上的酶，通过调节底物蛋白的磷酸化状态，进而调控众多细胞功能，包括信号转导、细胞周期进程、新陈代谢等。激酶谱会测定不同激酶的活性高低，活性的差异反映了细胞当下的生理或病理状态。例如，在肿瘤细胞中，某些促癌激酶的活性可能异常升高，驱动肿瘤的增殖与转移。激酶谱展示了各种激酶在样本中的含量情况。利用蛋白质印迹（Western blot）、酶联免疫吸附测定（ELISA）、质谱技术等手段，可以精准量化激酶的表达量。特定激酶表达上调或者下调，都暗示着细胞功能的改变，比如细胞分化时，部分调控分化进程的激酶表达量会显著变化。激酶并非随机选择底物，每个激酶都有偏好的底物蛋白类型，这就是底物特异性。梳理激酶谱有助于明确不同激酶对应的底物清单，知晓细胞内信号网络的具体流向。如蛋白激酶 A（PKA）主要磷酸化含有特定丝氨酸或苏氨酸残基的底物，精准调控糖原代谢、离子通道活性等过程。细胞内激酶之间也存在协同、拮抗等相互作用，共同编织起复杂的调控网络。激酶谱还会涵盖激酶与激酶之间、激酶与其他调节蛋白或支架蛋白的相互关系，像 Raf、MEK 和 ERK 激酶串联形成的 MAPK 信号通路，相互接力激活，驱动细胞增殖相关信号传递。

一、激酶谱研究的常见方法

1、蛋白芯片技术

蛋白芯片是一种高通量的分析工具，通过在微阵列上固定各类激酶，研究人员能够快速测定多种激酶的活性。这种方法的优势在于同时分析多个靶点，提供全面的激酶谱数据。

2、质谱分析

质谱技术广泛应用于激酶谱研究，以其高灵敏度和高特异性著称。通过标记磷酸化位点并进行质谱分析，可以精确测定激酶活性变化。质谱的另一大优势是能够分析复杂样品中的低丰度激酶。

3、放射性同位素标记法

这是最传统的激酶活性测定方法，通过同位素标记的磷酸盐来追踪激酶活性。尽管灵敏度较高，但由于安全性和处理复杂性的问题，应用受到限制。

二、激酶谱分析实验的注意事项

1、样本保存与运输

采集后的样本应及时处理，如不能立即处理，需根据样本类型选择合适的保存条件。血液样本一般在 4℃下保存，细胞或组织样本可在液氮中速冻后转移至 - 80℃保存。在保存和运输过程中，要避免样本反复冻融，以免影响激酶的活性和结构。

2、试剂质量与保存

确保使用高质量的激酶检测试剂盒、抗体、底物等试剂，严格按照试剂说明书的要求保存和使用。例如，一些酶底物需要避光保存，试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用。