摘要：细胞或组织提取物等样品中含有许多内源性的蛋白酶、磷酸酶等，容易导致提取物中的蛋白降解或去修饰，从而影响后续的蛋白检测。因此在提取物等样品中添加适当的蛋白酶、磷酸酶等抑制剂是防止蛋白降解和去修饰的有效方法。
细胞或组织提取物等样品中含有许多内源性的蛋白酶、磷酸酶等，容易导致提取物中的蛋白降解或去修饰，从而影响后续的蛋白检测。因此在提取物等样品中添加适当的蛋白酶、磷酸酶等抑制剂是防止蛋白降解和去修饰的有效方法。
蛋白酶抑制剂混合液 (EDTA-Free, 100×in DMSO)是一种广谱型用于细胞或组织蛋白提取等的蛋白酶抑制剂混合液，含有 Aprotinin、Bestatin、Leupetin、Pepstatin、PMSF 等多种抑制剂成分，可以有效抑制常规抽提和纯化蛋白中的各种蛋白酶活性，如氨基肽酶、半胱氨酸蛋白酶、丝氨酸蛋白酶、苏氨酸蛋白酶、酪氨酸和天冬氨酸蛋白酶等。
蛋白酶抑制剂混合液（EDTA-Free, 100×in DMSO）适配的荧光染料，核心优势是兼容性强、标记精准、信号稳定，能在保护蛋白完整性的基础上，高效支撑蛋白检测，具体如下：
蛋白酶抑制剂混合液（EDTA-Free, 100×in DMSO）适配的荧光染料，核心用于保护蛋白完整性后，实现裂解液中蛋白的精准标记、检测与分析，广泛支撑依赖蛋白活性保留的分子生物学研究，具体应用领域如下：
靶蛋白定量分析：抑制剂混合液抑制蛋白降解后，用荧光标记抗体（如 FITC、Cy5 标记二抗）与裂解液中靶蛋白结合，通过 WB、酶标仪检测荧光信号，精准定量正常 / 处理组（如药物、应激刺激）的蛋白表达差异。蛋白修饰鉴定：针对磷酸化、乙酰化等修饰蛋白，用荧光标记的修饰特异性抗体，检测抑制剂保护下的完整修饰蛋白，分析信号通路激活或调控机制（如肿瘤细胞中激酶磷酸化水平变化）。Co-IP 结合荧光验证：抑制剂避免互作蛋白降解，通过 IP 捕获靶蛋白复合物后，用两种不同荧光染料分别标记靶蛋白与候选互作蛋白的抗体，借助荧光共定位或信号关联，验证蛋白间相互作用（如转录因子与靶基因启动子结合蛋白）。蛋白复合物组分检测：用荧光染料标记蛋白探针，检测抑制剂保护下的裂解液中蛋白复合物的组成与含量，适配大分子复合物功能研究。基因功能验证：通过 RNAi、过表达调控基因后，抑制剂保护裂解液中蛋白不降解，用荧光染料标记检测靶蛋白表达变化，明确基因对蛋白水平的调控作用（如基因沉默后下游靶蛋白表达量变化）。活细胞 / 固定细胞蛋白成像：抑制剂与荧光染料联用，在细胞裂解前或裂解后标记蛋白，通过荧光显微镜观察蛋白在细胞内的定位，或分析裂解后蛋白的亚细胞组分分布（如核蛋白、胞质蛋白）。本文引用地址：https://www.med-life.cn/product/1296769.html
来源：老钱的科学大讲堂