摘要：乙醇在人体内参与多种代谢途径。摄入后，乙醇主要在肝脏通过氧化代谢进行代谢，涉及乙醇脱氢酶和乙醛脱氢酶，将乙醇转化为有毒的乙醛，再进一步转化为乙酸，最终生成二氧化碳和水。乙醇代谢影响能量平衡和营养物质的利用。乙醇的代谢优先于其他宏量营养素，导致过量的碳水化合物和

乙醇在人体内参与多种代谢途径。摄入后，乙醇主要在肝脏通过氧化代谢进行代谢，涉及乙醇脱氢酶和乙醛脱氢酶，将乙醇转化为有毒的乙醛，再进一步转化为乙酸，最终生成二氧化碳和水。乙醇代谢影响能量平衡和营养物质的利用。乙醇的代谢优先于其他宏量营养素，导致过量的碳水化合物和脂肪储存。长期饮酒会破坏代谢途径，影响肝脏功能、脂质代谢和血糖调节。AkrivisBio的乙醇检测试剂盒提供了一种简单、灵敏的乙醇测量方法，适用于多种样本。在检测中，乙醇氧化酶将乙醇氧化生成过氧化氢（H₂O₂），随后用于形成具有强烈颜色和荧光的荧光素，检测灵敏度可达0.05纳摩尔。

艾美捷乙醇测定试剂盒：

货号：MA-0131

应用：基于微孔板的比色法/荧光法检测，用于测量多种样本中的乙醇浓度。

灵敏度：0.05纳摩尔

储存条件：-20°C

运输条件：凝胶冷藏包

乙醇测定试剂盒检测组分：

-检测缓冲液：25毫升，货号WMMA-0131A

-ADHP溶液：200微升，红色，货号MA-0131B

-乙醇氧化酶/过氧化物酶：冻干粉，绿色，货号MA-0131C

-乙醇标准品（40mM）：0.2毫升，黄色，货号MA-0131D

乙醇测定试剂盒检测原理：

1.乙醇被乙醇氧化酶氧化，生成乙醛和过氧化氢。

2.过氧化物酶利用过氧化氢将ADHP氧化为荧光素，产生颜色和荧光。

注意：空气中的乙醇会对检测性能产生不利影响。检测必须在完全无乙醇的环境中进行。

储存和处理：在使用前将试剂盒储存于-20°C。使用前将检测组分恢复至室温。打开试剂瓶前请短暂离心。

-检测缓冲液：直接使用，储存于4°C。不使用时请紧密封闭。

-ADHP溶液：直接使用，储存于-20°C。

-乙醇氧化酶/过氧化物酶：向酶混合物中加入220微升检测缓冲液。储存于4°C。

-乙醇标准品：直接使用，储存于-20°C。仅在取样时打开，不使用时请紧密封闭。

检测步骤：

1.标准曲线：

-a.比色法检测：将10微升乙醇标准品转移至990微升检测缓冲液中，混合均匀，配制成0.4mM的工作溶液。将0、5、10、15、20、25微升的工作溶液分别转移至96孔板的多个孔中，用检测缓冲液将所有孔的体积调整至50微升，得到每孔0、2、4、6、8、10纳摩尔的乙醇标准系列。

-b.荧光法检测：按照比色法检测稀释标准品，然后将10微升转移至190微升检测缓冲液中，配制成20微摩尔的工作溶液。将0、5、10、15、20、25微升的工作溶液分别转移至9650微升，得到每孔0、100、200、300、400、500皮摩尔的乙醇标准系列。

2.样本准备：所有样本读数必须在标准曲线范围内，并应相应准备。液体样本可以直接使用或用检测缓冲液稀释后测试。血清应稀释约10-100倍。将所有孔的体积调整至50微升。

-注意：纯乙醇约为17M。酒精浓度为3%（约0.5M）至14%（2.4M）的酒精饮料需要稀释1000倍或更多。

3.启动反应：每个反应需要50微升反应混合液。

4.测量：在570纳米（比色法检测）或激发波长535纳米/发射波长580纳米处监测反应，室温下持续60分钟。

5.典型结果：

6.计算：

-从所有其他标准品和样本中减去零乙醇背景值（背景信号超过约0.1OD表明空气中存在微量乙醇。背景读数可能较大，必须从样本读数中减去。可以容忍高达0.5OD的背景）。绘制标准曲线。确定标准曲线的斜率。将背景校正后的样本值除以标准曲线的斜率，以获得孔中的乙醇纳摩尔数。将孔中的乙醇纳摩尔数除以加入孔中的样本体积（微升）=样本中的乙醇纳摩尔数/微升。如果样本来自组织或细胞，将样本中的乙醇纳摩尔数/微升乘以样本总体积，再除以用于制备样本的组织毫克数或细胞数量=每毫克组织（或每细胞数量等）中的乙醇纳摩尔数。

来源：科学三点半