谷氨酸测定试剂盒,比色法检测,适用于所有物种

B站影视 电影资讯 2025-04-09 16:46 1

摘要:谷氨酸是一种非必需氨基酸,在体内发挥多种重要的代谢作用。作为一种神经递质,它促进神经细胞之间的通信,有助于大脑功能和认知。谷氨酸也是蛋白质合成中的关键分子,有助于其他氨基酸的生成。此外,谷氨酸还是谷胱甘肽的前体,谷胱甘肽是一种强效抗氧化剂,能够帮助细胞抵御氧化

谷氨酸是一种非必需氨基酸,在体内发挥多种重要的代谢作用。作为一种神经递质,它促进神经细胞之间的通信,有助于大脑功能和认知。谷氨酸也是蛋白质合成中的关键分子,有助于其他氨基酸的生成。此外,谷氨酸还是谷胱甘肽的前体,谷胱甘肽是一种强效抗氧化剂,能够帮助细胞抵御氧化损伤。谷氨酸还参与能量代谢,因为它可以转化为α-酮戊二酸,这是三羧酸循环中的一个关键中间体。AkrivisBio的谷氨酸检测试剂盒是一种简单、灵敏的检测手段,能够检测多种组织中的谷氨酸含量,检测灵敏度可达每孔小于0.2纳摩尔。

艾美捷谷氨酸测定试剂盒:

货号:MA-0133

规格:100孔

样本类型:细胞裂解液、组织提取液、尿液、血清、血浆、其他生物流体

适用物种:通用(适用于所有物种)

检测方法:比色法,检测波长450纳米

检测类型:定量

应用:基于微孔板的比色法检测,用于测量样本中谷氨酸的浓度,最低检测浓度可达每孔0.2纳摩尔。

灵敏度:

储存条件:-20°C

运输条件:凝胶冷藏包

谷氨酸测定试剂盒组成:

-检测缓冲液:25毫升,货号WM MA-0133-A

-谷氨酸脱氢酶:冻干粉,绿色,货号MA-0133-B

-NAD/四氮杂卓混合液:冻干粉,红色,货号MA-0133-C

-谷氨酸标准品:100微升,黄色,货号MA-0133-D

谷氨酸测定试剂盒检测原理:

1. 谷氨酸在谷氨酸脱氢酶的作用下被氧化转化为α-酮戊二酸和氨(NH₃),同时NAD被转化为NADH。

2. NADH用于将四氮杂卓转化为具有最大吸收波长为450纳米的高色素甲臜。

储存和处理:

将试剂盒储存于-20°C。使用前将检测缓冲液恢复至室温。打开试剂瓶前请短暂离心。

检测缓冲液:直接使用,储存于4°C。

谷氨酸脱氢酶:用220微升检测缓冲液复溶。储存于-20°C。使用时保持在冰上。如果需要在一段时间内反复使用该试剂,建议将酶分装成小份量并储存于-20°C。

NAD/四氮杂卓混合液:用220微升去离子水复溶。

谷氨酸标准品(40 mM):直接使用。

检测步骤:

1. 标准曲线制备:将10微升谷氨酸标准品转移至990微升检测缓冲液中,配制成0.4 mM的溶液。将0、5、10、15、20、25微升的标准溶液分别转移至96孔板的多个孔中(每个浓度重复两次),以生成0、2、4、6、8、10纳摩尔/孔的标准系列。用检测缓冲液将所有孔的体积调整至50微升。

2. 样本准备:将组织(10毫克)或细胞(1×10⁶)在100微升检测缓冲液中匀浆。以16,000×g离心5分钟,去除颗粒。将上清液转移至新的试管中。将2-50微升样本转移至96孔板中。用检测缓冲液将所有孔的体积调整至50微升。准备一个平行的样本孔作为背景对照。建议测试几个不同浓度的样本,以确保读数在标准曲线范围内。

注意:某些样本可能会产生较高的背景值。为了应对这种情况,建议将样本以双份运行,其中一份用作背景对照。

3. 启动反应:每个反应需要100微升反应混合液。

4. 测量:在37°C下,使用微孔板读数器监测450纳米处的吸光度,持续30分钟。

5. 典型结果:

6. 计算:

-从所有标准品读数中减去0标准品的读数。绘制背景校正后的标准曲线。确定标准曲线的斜率。该斜率定义了从检测中获得的OD/纳摩尔值。

-从每个未知样本对中减去背景对照孔的读数。将背景校正后的未知样本值除以标准曲线的斜率,以确定样本孔中的谷氨酸含量。

-将这些值转换为原始样本中的谷氨酸含量:

-A. 孔中谷氨酸的纳摩尔数 / 应用于孔中的样本微升数 = 应用于孔中的样本中的谷氨酸纳摩尔数/微升

-B. 应用于孔中的样本中的谷氨酸纳摩尔数/微升 × 应用于孔中的样本总体积 = 应用于孔中的样本中的总谷氨酸纳摩尔数

-C. 应用于孔中的样本中的总谷氨酸纳摩尔数 / 毫克组织(或细胞数量等) = 纳摩尔数/毫克(细胞数量等)

来源:科学巅峰汇

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