摘要:方法:①从SD大鼠尾椎椎间盘中提取原代终板软骨细胞,通过甲苯胺蓝染色、Ⅱ型胶原蛋白免疫荧光鉴定;②CCK-8法检测白细胞介素1β、香草酸对终板软骨细胞增殖活力的影响,以确定后续处理细胞应用的香草酸浓度;③向完全培养基中添加10 ng/mL白细胞介素1β模拟炎症
文题释义:
香草酸:是一种从黄芪、当归等中草药和多种可食用植物中提取的酚类化合物,具有显著的抗炎、抗氧化作用。
终板软骨细胞:是一种位于椎间盘终板软骨中的透明软骨细胞,具有缓冲应力、供应营养的作用。
背景:研究表明,香草酸具有抗炎、抗氧化应激的作用,但它对终板软骨细胞是否有保护作用尚不清楚。
目的:探讨香草酸对炎症微环境下终板软骨细胞的作用及机制。
方法:①从SD大鼠尾椎椎间盘中提取原代终板软骨细胞,通过甲苯胺蓝染色、Ⅱ型胶原蛋白免疫荧光鉴定;②CCK-8法检测白细胞介素1β、香草酸对终板软骨细胞增殖活力的影响,以确定后续处理细胞应用的香草酸浓度;③向完全培养基中添加10 ng/mL白细胞介素1β模拟炎症微环境,用低、中、高质量浓度的香草酸处理终板软骨细胞,通过Western blot、免疫荧光检测炎症标志物和细胞外基质蛋白表达;④Western blot检测核因子κB信号通路蛋白水平。
结果与结论:①贴壁培养的终板软骨细胞形态呈梭形或三角形,甲苯胺蓝染色、Ⅱ型胶原蛋白免疫荧光阳性,证明实验提取的细胞为终板软骨细胞;②CCK-8结果显示,2.5,5,10,20 μg/mL香草酸处理终板软骨细胞24 h无明显增殖抑制效果;与白细胞介素1β组相比,5,10,20 μg/mL香草酸处理24 h的终板软骨细胞活力显著提高(P
https://orcid.org/0000-0001-5029-5466(林文平)
中国组织工程研究杂志出版内容重点:组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程
关键词: 香草酸, 终板软骨细胞, 炎症, 椎间盘退变, 核因子κB, 工程化组织构建
来源:中国组织工程研究杂志