摘要：先开启显微镜主机电源，再启动荧光光源（汞灯或LED），预热时间通常需10-30分钟‌。

倒置荧光显微镜使用流程

一、开机准备‌

电源启动‌

先开启显微镜主机电源，再启动荧光光源（汞灯或LED），预热时间通常需10-30分钟‌。

若需明场观察，单独开启卤素灯电源‌。

光路调节‌

将光路切换至目镜观察模式，确认荧光滤光片组处于空位或默认位置（如编号8或BF明场模式）‌。

调节聚光镜至明场（BF）或相差模式（PH1/PH2等），与物镜倍数匹配‌。

二、样本放置‌

样本处理‌

载玻片需盖玻片朝下放置（倒置模式），培养皿或孔板直接放置于载物台‌。

确保样本表面清洁，避免污染物镜‌。

固定与对焦‌

使用载物台夹固定样本，先用低倍物镜（如4X或10X）粗调焦距，再转至高倍物镜（如20X、40X）微调‌。

三、观察模式切换‌

明场观察‌

打开卤素灯光源，调节亮度至适中，通过粗/微调旋钮对焦‌。

荧光观察‌

切换至荧光光源，选择对应激发滤光片（如DAPI蓝光、FITC绿光、TRITC红光）‌。

拉出荧光滑片，关闭明场光源，通过光闸（SHUTTER）控制荧光曝光时间‌。

相差观察‌

明场对焦后，调整聚光镜转盘至相差环（PH1/PH2等），与物镜倍数匹配‌。

四、图像采集‌

光路切换‌

将光路从目镜切换至相机，打开控制软件（如ZEN、SimplePCI）‌。

参数设置‌

调节曝光时间、光源强度及对比度，使用预览功能（LIVE模式）确认图像清晰度‌。

明场需白平衡校正，荧光模式选择单色通道（W/B）‌。

拍摄与保存‌

点击拍摄按钮，保存图像至指定路径（推荐TIFF格式保留原始数据）‌。

五、关机流程‌

光源关闭‌

先关闭荧光光源（汞灯需冷却20分钟以上），再关闭明场光源‌。

设备复位‌

将滤光片组调至安全位置（如编号8），物镜转至空档，取下样本并清洁载物台‌。

关闭软件、电脑及显微镜主机电源‌。

注意事项‌

汞灯使用‌：每次开启后需持续工作≥30分钟，关闭后间隔≥30分钟再重启；寿命约500小时，超时需更换‌。

清洁维护‌：避免直接接触物镜和滤光片，使用后登记使用记录‌。

安全操作‌：高倍物镜对焦时防止压碎载玻片，切换光路时避免强光直射眼睛‌。

来源：我可以不吃东西