IP 条带离家出走？这 5 个因素最容易被忽视，排查表拿走不谢

摘要：重复了三次 IP 实验，Input 条带清晰，但 IP 组信号弱到看不见……得挨个排查，裂解液成分需要优化，但后期还会有抗体结合效率低、蛋白复合体解离、或者存在竞争性结合的问题，防不胜防啊。回想起来大师姐的 IP/Co-IP 几乎次次成功，但她的 protoc

科研日记 2025.03.27

重复了三次 IP 实验，Input 条带清晰，但 IP 组信号弱到看不见……得挨个排查，裂解液成分需要优化，但后期还会有抗体结合效率低、蛋白复合体解离、或者存在竞争性结合的问题，防不胜防啊。回想起来大师姐的 IP/Co-IP 几乎次次成功，但她的 protocol 从来不让人看，emmm，要不明天去偷一下试试（文末查看 IP 实验信号弱的原因与解决方案）

在纯化出高活性蛋白与捕获真实互作信号等实战中，科研人总是面临许多难点：

如何避免 IgG 对照组与 IP 组同步出带，证明特异性结合？

低丰度蛋白互作信号弱，怎样提高富集效率？

IP 后 WB 检测发现条带位置偏移，是降解还是修饰导致？

如何根据目标蛋白的特性选择标签位置，维持互作特异性的同时提升纯化效率？

如何通过洗脱条件调整维持蛋白的稳定性，避免纯化过程中降解？

丁香园联合IBA Lifesciences开展主题为「从案例解码，蛋白互作核心方法 IP/Co-IP 技术精要与进阶」的线上直播，结合蛋白纯化关键策略，直击蛋白互作方法 IP/Co-IP 实验本质，从抗体选择逻辑、样本特异性优化到典型/异常条带深度解析，通过真实案例拆解技术盲区，从纯化到互作优化您的蛋白质研究。点击下方小程序码即刻报名，还有马克杯、U盘、充电宝免费送～

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直播亮点抢先看

主题 1：轻松搞定蛋白纯化与互作分析

本课程将深入解析 Strep-tag® 技术的基本原理和实际应用，重点讨论蛋白质研究中的关键难题，例如如何选择合适的表达系统、优化标签位置以及调整洗脱条件。通过具体案例，结合 2024 年诺贝尔化学奖「计算蛋白质设计」背景，展示该技术在药物筛选、抗体工程及酶动力学等领域的应用。课程还将指导如何根据蛋白质特性（如结构特点或修饰需求），从宿主选择到分析方法优化，构建高效工作流程。

主题 2：从原理到案例：搞定蛋白互作核心方法 IP/Co-IP

本课程将系统解析 IP/Co-IP 技术在蛋白互作研究中的核心原理与应用逻辑，从该方法在机制验证中的不可替代性切入，深入探讨在实验中如何规避非特异性干扰等问题，并针对细胞、组织、血清等不同样本类型定制裂解与富集策略。同时课程将结合典型结果与特殊案例解读，剖析实验中遇到的疑难杂症。

以下是偷拍到的大师姐实验笔记，大家可以悄悄收藏～

IP 实验信号弱的原因与解决方案