摘要：脂质是一类多样化的分子，包括单酰甘油、二酰甘油、三酰甘油、脂肪、甾醇等。脂质不仅定义和维持细胞膜的完整性，还参与细胞过程，如膜运输、信号转导、细胞凋亡和能量储存。脂质代谢的紊乱与多种疾病有关，如癌症、糖尿病、阿尔茨海默病和冠心病。

脂质是一类多样化的分子，包括单酰甘油、二酰甘油、三酰甘油、脂肪、甾醇等。脂质不仅定义和维持细胞膜的完整性，还参与细胞过程，如膜运输、信号转导、细胞凋亡和能量储存。脂质代谢的紊乱与多种疾病有关，如癌症、糖尿病、阿尔茨海默病和冠心病。

为了研究脂质，通常需要首先从组织或培养细胞中提取它们。传统上，Folch方法（参考文献1）的有机提取是首选，但这种方法存在几个缺点。首先，它将脂质提取到底部有机相中，在纯化过程中，上层含蛋白质的相会穿透到底部，导致脂质样本受到污染。因此，低纯度的脂质样本可能会因堵塞仪器（如高效液相色谱仪）而阻碍下游脂质分析。此外，Folch方法使用氯仿作为有机相溶剂。长期吸入氯仿会导致肝脏受损，如肝炎和黄疸。此外，氯仿已被证明在动物中具有致癌性，导致肾脏和肝脏肿瘤增加。事实上，美国环境保护署（EPA）已将氯仿归类为B2组，可能的人类致癌物。

艾美捷脂质提取试剂盒(无氯仿)（#STA-612）通过有机提取分离总脂质，但通过将脂质提取到上层有机相（使其适用于高通量提取）并避免使用氯仿，从而避免了上述缺点。将粗脂质来源（如血清或组织培养细胞沉淀）重悬于专有的酒精中。加入专有的有机化合物后，混合物通过离心分离各相。回收的上层有机相随后干燥并重悬，用于下游脂质分析。每套试剂盒提供足够的试剂，可分离多达50个样本（基于100 µL样本量）。可以使用更大的样本量（见表1），但每套试剂盒的分离次数会相应减少。

脂质提取试剂盒(无氯仿)相关产品：

1. STA-613：脂质定量试剂盒（比色法）

2. STA-369：OxiSelect™人氧化LDL ELISA试剂盒（MDA-LDL定量）

3. STA-384：总胆固醇测定试剂盒（比色法）

4. STA-391：HDL和LDL/VLDL胆固醇测定试剂盒

5. STA-394：HDL胆固醇测定试剂盒

6. STA-396：血清三酰甘油定量试剂盒（比色法）

7. STA-398：游离甘油测定试剂盒（比色法）

8. STA-618：游离脂肪酸测定试剂盒（比色法）

9. STA-600：磷脂酰胆碱测定试剂盒

试剂盒组成（室温运输）：

1. 脂质提取试剂A（部件编号261201）：一瓶25 mL琥珀色玻璃瓶。

2. 脂质提取试剂B1（部件编号261204）：两瓶30 mL琥珀色玻璃瓶。

3. 脂质提取试剂B2（部件编号261205）：一瓶20 mL琥珀色玻璃瓶。

4. 脂质提取试剂C（部件编号261203）：一瓶25 mL。

未提供材料：

1. 玻璃管、15 mL锥形管或微量离心管

2. 10 µL至1000 µL可调单通道移液器及一次性吸头

3. 50 µL至1000 µL可调多通道移液器及一次性吸头

4. 多通道移液器储液槽

5. 磷酸盐缓冲液（PBS）

6. 试管涡旋器

7. 有机溶剂（如氯仿、丁醇或环己烷）

储存：

将整个试剂盒储存于室温。为避免可能的泄漏，请将瓶子直立存放。

试剂准备：

- 脂质提取试剂B：将3份脂质提取试剂B1与1份脂质提取试剂B2在琥珀色玻璃瓶中混合。充分混合后，保存于避光处，直至使用。

样本准备：

- 血浆：用抗凝剂（如柠檬酸、EDTA、肝素或草酸盐）收集血液，并通过翻转混合。在4°C下以1000 x g离心10分钟。收集血浆上清液，避免干扰白色白细胞层。样本应立即提取，或在-80°C下保存。

- 血清：在无抗凝剂的试管中收集血液。让血液在室温下凝固30分钟。以2500 x g离心20分钟。小心移除黄色血清上清液，避免干扰白色白细胞层。样本应立即提取，或在-80°C下保存。

- 培养细胞：将5-10×10⁶个细胞以1000 x g离心5分钟。用1X PBS洗涤细胞一次，最后将细胞沉淀重悬于100 µL 1X PBS中。按照试剂盒协议进行提取。

- 组织：小心地用手术刀/剃刀片将组织切成小块，并在50 mL锥形管中称重。加入PBS，使组织浓度达到2 mg/mL。在4°C下匀浆组织。按照试剂盒协议从全组织匀浆中进行提取。

结果示例：

以下图表展示了使用脂质提取试剂盒制备的样本进行的各种检测的典型结果。以下数据仅供参考，不应用于解释实际结果。

图1：总胆固醇测定（产品编号STA-390）

(A) 胆固醇标准曲线。

(B) 使用Folch方法（蓝色条）或无氯仿的脂质提取试剂盒（红色条）从胎牛血清（FBS）或HEK293细胞中提取的脂质，根据检测协议检测胆固醇的存在。

图2：游离脂肪酸测定（产品编号STA-619）

(A) 游离脂肪酸（FFA）标准曲线。

(B) 使用Folch方法（蓝色条）或无氯仿的脂质提取试剂盒（红色条）从胎牛血清（FBS）或HEK293细胞中提取的脂质，根据检测协议检测游离脂肪酸的存在。

脂质提取试剂盒(无氯仿)文献参考：

1. Folch J, Lees M, and Slone Stanley GH (1956) J. Biol. Chem. 226, 497-509.

2. Iverson SJ, Lang SLC, and Cooper MH (2001) J. Lipid Res. 36, 1283-1287.

3. Bang DY, Byeon SK, Moon MH (2014) J. Chromatogr A. 28, 1331

4. Reis A, Rudnitskaya A, Blackburn GJ, Mohd Fauzi N, Pitt AR, Spickett CM (2013) J. Lipid Res.,

54, 1812-1824.

来源：科学人人