【飞诺美色谱】猪肉和牛肉中五氯酚钠残留量的测定

摘要：本实验根据GB 23200.92-2016，采用固相萃取结合液相色谱-串联质谱的方法，在多反应监测(MRM)模式下建立了动物源性食品中五氯酚钠残留量的测定方法。样品中的五氯酚钠经异丙醇提取，Cleanert PAX固相萃取柱净化，Venusil MP C18色

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本实验根据GB 23200.92-2016，采用固相萃取结合液相色谱-串联质谱的方法，在多反应监测(MRM)模式下建立了动物源性食品中五氯酚钠残留量的测定方法。样品中的五氯酚钠经异丙醇提取，Cleanert PAX固相萃取柱净化，Venusil MP C18色谱柱（3.0 × 50 mm，3 µm，100 Å）分离，5 mmol/L乙酸铵水溶液和甲醇为流动相进行梯度洗脱，外标法进行定量。

样品信息

仪器、试剂与材料

试剂材料

·色谱纯甲醇

·分析纯氢氧化钠

·分析纯异丙醇

·色谱纯乙酸铵

·色谱纯甲酸

·固相萃取小柱：Cleanert PAX (60 mg/3 mL)

样品制备

溶液配制

5%氨水溶液：量取200 mL浓氨水（25%），转移

入1000 mL容量瓶，用水定容至刻度，混合均匀。

4%甲酸甲醇溶液：量取10 mL甲酸，转移入250 mL容量瓶，用甲醇定容至刻度，混合均匀。

2%甲酸甲醇水溶液：取一定量4%甲酸甲醇溶液与水等体积混合均匀。

样品提取

称取2 g均质好的样品置于50 mL离心管中，加入2 mL纯净水，涡旋混合；加入400 µL 10 mmol/L NaOH，涡旋混合；加入4颗玻璃珠均质子及5 mL异丙醇剧烈震荡2 min，再次加入5 mL异丙醇剧烈震荡2 min后再次加入5 mL异丙醇剧并烈震荡2 min；并于8000 rpm条件下离心5 min，取上清液备用。

样品净化

先将Cleanert® PAX (60 mg/3 mL)小柱分别用5 mL甲醇、 5 mL 水活化平衡后，将上清液过柱，弃去流出液。依次用5 mL 5%氨水、5 mL甲醇、5 mL 2%甲酸的甲醇水溶液淋洗，淋洗液完全通过小柱后，弃去流出液，用真空泵抽干固相萃取柱5 min以上。以5 mL 4%甲酸的甲醇溶液洗脱，洗脱液在40℃条件下氮吹干，用1 mL甲醇复溶，溶液以0.22 μm PTFE-Q 滤膜过滤上样。

基质混合标准工作溶液配制

取高浓度五氯酚钠标准溶液，用空白样品基质溶液稀释成5 ng/mL的基质混合标准工作溶液。

色谱条件

流动相：

A相：5 mmol/L乙酸铵水溶液；B相：甲醇

流速：0.4 mL/min

柱温：30.0℃

进样量：20 µL

梯度洗脱：见表2

质谱条件

仪器：AB SCIEX API 4000+

离子源：电喷雾离子源

扫描方式：负离子扫描

电喷雾电压：-4500 V

雾化气压力：35 psi

气帘气压力：20 psi

辅助气压力：60 psi

离子源温度：550℃

采集方式：多反应监测(MRM)

Q1、Q3均为单位分辨率

质谱参数(见表3)

结果与讨论

结论

本实验根据GB 23200.92-2016建立了动物源性食品中五氯酚残留量的LC-MS/MS检测方法。五氯酚存在与蛋白高比例结合的问题，本实验通过改变提取溶剂与pH调节剂对于加标量为2.5 µg/kg的猪肉样品进行了检测，回收率高于80%；加标量为2.5 µg/kg的牛肉样品进行了检测，回收率高于70%；符合检测标要求，固相萃取方法稳定并且色谱柱重现性良好，说明本方法能够用于检测动物源性食品中的五氯酚残留量。

实验结果