摘要:肝癌死亡率高,中国是高发地区。西药治疗肝癌存在诸多副作用,传统中药在肝癌防治方面具有副作用低等优势,挖掘抗肿瘤中药并明确其机制意义重大。桑黄是药用真菌,其多糖被认为是抗肿瘤重要成分,但不同地区和寄主的桑黄成分与功效存在差异。研究旨在探究不同来源桑黄粗多糖对肝癌
出版日期:2020年
发表刊物:《蚕业科学》
论文作者:朱俭勋,钟石,孙海燕,孙雨晴,霍进喜,陈伟国,吕志强,计东风,李有贵
肝癌死亡率高,中国是高发地区。西药治疗肝癌存在诸多副作用,传统中药在肝癌防治方面具有副作用低等优势,挖掘抗肿瘤中药并明确其机制意义重大。桑黄是药用真菌,其多糖被认为是抗肿瘤重要成分,但不同地区和寄主的桑黄成分与功效存在差异。研究旨在探究不同来源桑黄粗多糖对肝癌细胞HepG2的抑制作用及机制,为开发抗肿瘤产品提供理论依据。
材料与方法
实验材料
人肝癌细胞HepG2及多种试剂,桑黄子实体来自不同地区和寄主,引物由公司合成。
实验方法
提取桑黄粗多糖,培养HepG2细胞。通过MTT法检测多糖对细胞增殖的抑制率;PI流式细胞术分析细胞周期分布;Annexin V - PI双染流式细胞术检测细胞凋亡;qRT - PCR检测细胞周期和凋亡相关基因表达。数据采用软件进行多重方差分析和t检验。
研究结果
对细胞增殖的影响
不同来源桑黄粗多糖对HepG2细胞增殖抑制作用差异显著。多数粗多糖有抑制作用且呈浓度依赖性,如SH1、SH3、SH13在800μg/mL时抑制率较高;SH8和SH12的粗多糖有促增殖作用。
对细胞周期的影响
SH1和SH13粗多糖诱导HepG2细胞S期阻滞,SH1处理后,细胞比率下降,S期细胞比率上升,细胞比率下降;SH3对细胞周期各时相分布影响不显著。
对细胞凋亡的影响
800μg/mL的SH1、SH3、SH13粗多糖均促进HepG2细胞凋亡,早期、晚期凋亡细胞及坏死细胞比率均显著提高。
对相关基因表达的影响
SH1、SH13粗多糖显著影响细胞周期相关基因表达,上调P21、P27、P57、CyclinA等基因,SH1还下调CDK2表达;三者均提高促凋亡蛋白基因Bcl - XS、Bad、Bax表达,SH1、SH13提高Bid表达,同时SH1、SH13也提高抗凋亡基因Bcl - 2水平。
分析讨论
药用价值差异
不同地区和寄主的桑黄粗多糖药用活性不同,这可能与桑黄的成分差异有关,为桑黄的开发利用提供了参考。
细胞周期阻滞机制
SH1、SH13粗多糖通过激活CyclinA - CDK3等复合物促进细胞进入S期,同时抑制Cyclins - CDK2复合物,诱导S期阻滞。
细胞凋亡机制
桑黄粗多糖促进HepG2细胞凋亡,上调促凋亡蛋白基因表达,但对同时提高Bcl - 2基因表达的原因有待进一步研究。
结论
本研究表明不同来源桑黄粗多糖对肝癌细胞HepG2的作用不同,多数有抑制增殖、诱导S期阻滞和凋亡的作用,其机制与调控细胞周期和凋亡相关基因表达有关。这为深入了解桑黄的抗肿瘤机制及开发新型抗肿瘤药物提供了理论基础,但仍有部分机制需进一步探究。
★ 本文章由千济方桑黄医学研究院整理,仅供学术交流,欢迎指正。
来源:千济方