摘要：基于已知对泛素具有亲和力的蛋白质结构域，串联泛素结合体（TUBEs）已被开发用于分离和鉴定泛素化蛋白。TUBEs对多泛素链的亲和力比单个泛素结合相关结构域（UBA）高出多达1000倍。此外，TUBEs对多泛素化蛋白具有保护作用，使其即使在低丰度条件下也能被检测

基于已知对泛素具有亲和力的蛋白质结构域，串联泛素结合体（TUBEs）已被开发用于分离和鉴定泛素化蛋白。TUBEs对多泛素链的亲和力比单个泛素结合相关结构域（UBA）高出多达1000倍。此外，TUBEs对多泛素化蛋白具有保护作用，使其即使在低丰度条件下也能被检测到。这些特性有效地“捕获”了处于多泛素化状态的蛋白质。LifeSensors开发了HRP-TUBE 2，用于快速、便捷地检测多泛素链和多泛素化底物。

货号：UM-0312-0050

纯度：通过SDS-PAGE检测，纯度>95%

分子量：38.5 kDa + HRP

标签：辣根过氧化物酶（HRP）

物理状态：液体

数量：50 µg

储存：-80°C。避免反复冻融。

应用：

通过配体印迹法检测多泛素化蛋白。

使用各种现成的生物素支持物从细胞系、组织和器官中捕获多泛素化蛋白。

通过组织化学法进行多泛素的原位标记检测。

[干冰]TUBE 2(HRP标签)实验结果：

连接有HRP的TUBEs能够通过远西方印迹法检测到HeLa细胞裂解液中的多泛素化链和多泛素化蛋白。将TUBE-HRP稀释至5%脱脂奶粉PBS-T溶液中的1:4000，成功检测到不同加载量（每孔500、250、10、50 ng）的-K48和-K63多泛素化链。TUBE-HRP还成功检测到来自HeLa细胞裂解液（每孔加载30 µg）的多泛素化特征。如质量控制图像所示，经过蛋白酶体抑制剂（PI）处理的细胞表现出增强的泛素化特征，这与预期一致，当使用1:4000稀释的TUBE2 HRP进行检测时。

文献参考：

Donaghy, Ryan, et al. “The BRISC deubiquitinating enzyme complex limits hematopoietic stem cell expansion by regulating JAK2 K63-ubiquitination.” Blood, vol. 133, no. 14, 2019, pp. 1560-1571.

Lv, Kaosheng, et al. “CBL family E3 ubiquitin ligases control JAK2 ubiquitination and stability in

hematopoieticstem cells and myeloid malignancies.” Genes & Development, vol. 31, 2017, pp. 1007-1031.

来源：科学风向标