摘要：噬菌体是一类病毒，原指细菌病毒，如今发现真菌、藻类等也都有噬菌体。噬菌体（bacteriophage，phage）是感染细菌、真菌、藻类、放线菌或螺旋体等微生物的病毒的总称，因部分能引起宿主菌的裂解，故而得名。它于本世纪初在葡萄球菌和志贺菌中被首次发现。作为病

噬菌体是一类病毒，原指细菌病毒，如今发现真菌、藻类等也都有噬菌体。噬菌体（bacteriophage，phage）是感染细菌、真菌、藻类、放线菌或螺旋体等微生物的病毒的总称，因部分能引起宿主菌的裂解，故而得名。它于本世纪初在葡萄球菌和志贺菌中被首次发现。作为病毒的一种，噬菌体具有个体微小、无完整细胞结构、只含单一核酸等特性。生产中常见的噬菌体呈蝌蚪形，直径约 0.1μm，其形态需通过电子显微镜放大 9×10⁴倍才能看见。

噬菌体的主要特征

专一的寄生性：噬菌体只能在特定的宿主细胞内生长繁殖，且宿主细胞必须是活的、处于繁殖阶段的细胞，无法脱离宿主自行生长。若不同菌株亲缘关系较近，也可能被感染，因此长期生产同一产品的发酵工厂在换新菌株前，务必了解其背景。

不耐热性：游离的噬菌体在 45℃条件下 10 分钟即可失活。

不耐药性：直接向噬菌体喷洒 1% 新洁尔灭、75% 酒精、1% 双氧水、5% 的甲醛等，都能使其失去活性。

发酵感染噬菌体的常见现象

发酵液指标异常：发酵液光密度可能先上升后下降，也可能不上升，当人为接入1% 的噬菌体时，光密度会始终处于低位；pH 值逐渐上升，一般升至 7.5 后不再下降；耗糖、耗氨速度缓慢甚至停止。

发酵液状态改变：发酵液中泡沫增多，料液略显黏稠。

菌体变化：镜检可发现菌体数量减少、菌体发胖，革兰氏染色后可见红色碎片。严重时，菌体可出现拉丝、网状或鱼刺状，几乎看不到完整菌体。

出现噬菌斑：用含有噬菌体的发酵液点在平板上，能够看到噬菌斑。

噬菌体感染原因分析

原料与菌种问题：原料或 IPTG 遭受噬菌体污染，同时菌株存在溶原性，可能导致噬菌体在一定条件下被激活。

空气传播：发酵车间环境中的噬菌体可随空气进入发酵罐。尽管发酵罐设有空气过滤器，但无法完全拦截噬菌体，实践已证明，从过滤器的洗脱液中通过电镜可观察到噬菌体。

设备清洁不到位：罐体、管道清洗消毒不彻底，或长期使用后存在顽固性生物膜，都可能造成噬菌体再次污染。因为温度和药物虽能灭活噬菌体，但总有部分噬菌体可能存活，并非达到一定温度就能将其全部杀灭，空气加热也存在同样的问题。

管理疏忽：车间管理若存在疏忽，认为发酵仅与发酵车间有关，忽视了各部门协作与全员参与，就难以有效预防噬菌体污染。预防噬菌体需要全体员工提高意识，各部门长期配合。

预防控制措施

控制活菌体排放：活菌体排放是噬菌体滋生的关键，每次上罐前要对发酵罐进行空气试漏。接种后，需用蒸汽或诺沃赛德噬菌体清除剂等对残余种子液、接种瓶、种子罐及其连接管道附件等进行消毒，未经灭活处理的种子液严禁排入污水池。

规范取样操作：发酵过程中定时取样时，应在无风条件下进行，取样口下方放置装有 pH≥11 碱液的容器，除取样瓶内的料液外，其余料液都要进入碱液容器，不得喷洒或直接排入下水道。取样后，要用消毒水对取样者的手、取样瓶、装碱容器以及以取样品为中心的上下左右 1m 空间进行喷洒消毒，取样瓶需放在盛有消毒水的容器中直至送至化验室。

切断接触途径：若难以完全杜绝活菌外泄，可通过提高吸风口高度来减少噬菌体与发酵液接触的机会，建议吸风口最低高度超过发酵车间楼顶 10m。

加强环境消毒：车间内部使用诺沃赛德噬菌体清除剂对地面、角落和空间进行喷洒，定期用欧菲姆干雾设备搭配药物进行空气熏蒸，必要时对发酵罐体及管道也进行熏蒸。每天早晚用诺沃赛德噬菌体清除剂对车间地沟消毒，保持地沟清洁无积水。车间周围用 ClO₂、漂白粉每天喷洒 2 次。

强化普查力度：定期（3 天 1 次）对车间内外部环境的杂菌含量普查统计，重点部位每天普查，对不合格区域重点消毒并分析杂菌来源。每月选取有代表性的样品灭活后用电镜复检。