王卉教授、陈曼医生：异基因造血干细胞移植后巨细胞病毒感染患者

摘要：第66届美国血液学会（American Society of Hematology，ASH）年会于2024年12月7日至10日在美国圣迭戈盛大召开。作为全球血液学领域规模最大的国际学术盛会之一，汇集了最前沿的研究进展及最新的药物研发数据，展示全球血液学领域的最

编者按：第66届美国血液学会（American Society of Hematology，ASH）年会于2024年12月7日至10日在美国圣迭戈盛大召开。作为全球血液学领域规模最大的国际学术盛会之一，汇集了最前沿的研究进展及最新的药物研发数据，展示全球血液学领域的最高学术水平。多参数流式细胞术（MFC）是检测免疫细胞精细化亚群、进行免疫功能评价的重要技术方法。陆道培医院王卉教授团队陈曼医生一项研究得以入选，利用MFC探讨了异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）后巨细胞病毒（CMV）感染患者的免疫状态，为了深入了解该研究，《肿瘤瞭望-血液时讯》特邀王卉教授、陈曼医生对该研究进行深入解读和分析，现整理如下。

摘要号：4874

英文标题：Clinical and Immunological Characteristics of Patients with CMV Infection after Allogeneic Hematopoietic Stem Cell Transplantation

中文标题：异基因造血干细胞移植后巨细胞病毒感染患者的临床及免疫学特征

第一作者：陈曼

通讯作者：王卉

研究背景

CMV感染是allo-HSCT后最常见的并发症，在单倍型移植中CMV 感染的发生率高达 60％～83％，中位起病时间为移植后32～37 天。尽管目前allo-HSCT患者广泛采用抗CMV感染的预防和早期治疗方案，但该病毒仍是导致非复发死亡率（NRM）的主要因素之一。为了探究免疫细胞亚群在CMV感染中的作用，本研究将97例allo-HSCT后患者分为CMV感染组和非感染组，采用MFC分析两组患者的临床特征、移植后30天外周血样本淋巴细胞亚群数量，以期为指导临床防治CMV感染提供实验室依据。

研究方法

研究纳入了自2021年5月至2023年1月期间，在北京陆道培医院接受allo-HSCT后发生CMV感染的患者50例，以及未发生CMV感染且无其他病毒合并感染的患者47例。收集临床信息并检测患者移植后+1月时间点外周血淋巴细胞亚群结果。MFC淋巴细胞精细亚群检测方案如下：

第1管：绝对计数管，CD3 FITC/CD16+CD56 PE/CD45 PerCP/CD4 PE-Cy7/CD19 APC/CD38 BV421/CD8 APC-Cy7/CD45 V500。

第2管：普通流式管，CD45RA FITC/CD127 PE/CD4 PerCP/CD25 APC/CD197 PE Cy7/CD279 BV421/CD8 APC Cy7/CD3 BV510。

研究结果

1、在CMV感染组患者中22%（11/50例）明确CMV病毒血症合并CMV病毒，其外周血全血CMV病毒最高拷贝数中位值1600（1400-5800）copies/ml，显著高于未明确合并CMV病毒患者970（670-2300）copies/ml，（z=-2.281，P=0.029）。

2、到随访终点CMV感染组患者1年总生存（OS）为80%（40/50）与非CMV感染组患者87.2%（41/47）差异无统计学意义（C2=0.231，P=0.630）（见图1）。

图1. CMV感染组与非CMV感染组随访终点OS情况

3、在预处理中使用抗人T细胞兔免疫球蛋白（ATLG）组的感染发生率30%（6/20）低于兔抗胸腺细胞免疫球蛋白（ATG）组57.1%（44/77）（z=4.683，P=0.030）。在回输过程中，CMV感染组回输的CD34阳性细胞数量5.06（4.0425-6.124）×106/kg（受者体重）显著低于非感染组6.97（5.07-8）×106/kg（受者体重）（Z=-2.944，P=0.003）。两组患者在患者性别、基础疾病类型、移植前疾病状态（NR/CR）等方面，均无显著差异（P＞0.05）（表1）。

表1.CMV感染组与非CMV感染组临床特征差异性分析

注：CMV为巨细胞病毒，GVHD为移植物抗宿主病，ALL为急性淋巴细胞白血病，AML为急性髓系白血病，CML为慢性粒细胞白血病，MDS为骨髓增生异常综合征，AA为再生障碍性贫血，CMML为慢性粒单核细胞白血病，NK/T为自然杀伤/T细胞，MPAL为急性混合细胞性白血病，CR为完全缓解，PR为部分缓解，NR为未缓解，TBI为全身照射，BM为骨髓，PBSC为外周血造血干细胞

4、与非CMV感染组相比，CMV感染组免疫重建较差，表现为较低的CD3+T、CD4+T淋巴细胞占总淋巴细胞百分比，呈现出病毒活化的免疫状态，表现为较高的自然杀伤（NK）细胞占淋巴细胞百分比和绝对计数，较高的NK与CD8+T细胞绝对数比值，较高的 CD3+CD38+T细胞占CD3+T细胞、CD4+CD38+T细胞占CD4+T细胞、CD8+CD38+T细胞占CD8+T细胞百分比。且CMV感染组有较高的CD8+效应记忆T细胞（TEM）占CD8+淋巴细胞百分比，较低的 CD4+幼稚（Naive）T细胞占CD4+淋巴细胞、CD8+终末效应（EMRA）T占CD8+淋巴细胞、CD8+NaiveT占CD8+淋巴细胞百分比，T细胞倾向与活化和耗竭状态。（见图2-3）

图2. CMV感染组及非CMV感染组淋巴细胞差异性分析

图2. CMV感染组及非CMV感染组淋巴细胞特征火山图

5、在二元逻辑斯回归模型中，患者回输的CD34细胞数、移植后亚群CD3+CD38+T细胞占CD3+T细胞百分比、CD4+CD38+T细胞占CD4+淋巴细胞百分比为发生感染的重要独立危险因素，受试者工作特征曲线（ROC）结果显示CMV感染的独立危险因素曲线下面积（AUC）为0.914（>0.7，P＜0.001），决断值为0.702，灵敏度为0.857，特异性为0.844。（见表2、图4）

表2. 发生CMV感染的独立危险因素分析

图4. 感染CMV的独立危险因素分析ROC曲线

研究结论

allo-HSCT移植后，与非CMV感染组相比，CMV感染组免疫亚群免疫重建较差，感染状态活化以及T淋巴细胞耗竭，并表明活化指标CD38在T细胞上的表达水平对于CMV感染有较好的判断价值。

研究者说

MFC是检测和筛查恶性肿瘤、癌前病变等克隆性和遗传免疫相关疾病的重要工具，在疫情后时代被广泛推广，本研究探讨了allo-HSCT后CMV感染患者免疫状态，以期在CMV及其他并发症的鉴别和诊疗过程中提供临床思路，减少并发症的发生和减轻症状，切实为患者从经济和身体压力上减轻负担。本研究的临床指导意义也在2024年初经人民日报社健康客户端报道，获得良好的反馈。

王卉教授在ASH 2024会议现场

王卉教授

陆道培医院

陆道培医疗（河北燕达陆道培医院，北京陆道培医院），研究员

北京陆道培血液病研究院副院长，检验科副主任（副院长级），信纳克实验室主任

主要学术兼职：中华检验医学杂志编委，中国中西医结合学会检验专委会流式专委会主任委员，北京医学检验学会副会长，中国中西医结合学会检验医学专业委员会委员，中国抗癌协会淋巴瘤学组委员，中华医学会检验医学分会临床血液体液学组委员等众多学会常委、委员、顾问。主要研究方向从事流式细胞术23年，第一发明人美国发明专利2个，国内发明专利8个。通讯作者发表中国流式专家共识6篇，另参与共识编写8篇，第一和通讯作者发表SCI及核心期刊文章60篇