摘要：桑黄（Phellinus baumii）作为担子菌门真菌的重要药用物种，其富含的多酚类化合物因潜在的抗肿瘤活性备受关注。尽管前期研究已证实桑黄多酚（Polyphenols of Phellinus baumii, PBP）具有抗氧化、抗炎及免疫调节作用，但其抗

出版日期：2012年

来源学校：浙江大学

论文作者：崔诗遥

桑黄（Phellinus baumii）作为担子菌门真菌的重要药用物种，其富含的多酚类化合物因潜在的抗肿瘤活性备受关注。尽管前期研究已证实桑黄多酚（Polyphenols of Phellinus baumii, PBP）具有抗氧化、抗炎及免疫调节作用，但其抗肿瘤的物质基础与分子机制仍需系统解析。浙江大学研究团队在研究中，通过成分鉴定、体外药效评价及机制探究，构建了 “成分 - 活性 - 靶点” 的完整研究体系，为桑黄多酚的药用开发提供了重要科学依据。

桑黄多酚的化学物质基础

高效分离纯化技术

研究采用超声辅助乙醇回流提取 - 大孔树脂纯化技术，获得纯度达 94.47±4.10% 的桑黄多酚。该方法结合了超声辅助提取的高效性与大孔树脂的选择性吸附，显著提升了多酚类成分的富集效率，为后续成分分析奠定基础。

UPLC-ESI-QTOF-MS 成分解析

利用超高效液相色谱 - 电喷雾离子阱 - 飞行时间质谱（UPLC-ESI-QTOF-MS），结合 PeakView 软件及数据库匹配，从 PBP 中鉴定出17 种多酚类化合物，包括原儿茶醛、咖啡酸、Osmundacetone、Hispidin 等。其中，Interfungin B 作为特征成分，其二级质谱（MS²）裂解途径显示，通过 C 环断裂与羟基化修饰产生的碎片离子（m/z 217.0479、159.0421），可能与其抗氧化及抗肿瘤活性直接相关。

注：图示为研究中 Interfungin B 的特征碎片离子及其裂解路径，显示其结构中的羟基化与环断裂反应

结构多样性与活性关联

鉴定成分涵盖苯丙酸类、芪类、色原酮类等多种骨架，其中 Hispidin（4-(3,4 - 二羟基苯基)-3 - 丁烯 - 2 - 酮）等芪类化合物被证实具有靶向调控肿瘤细胞信号通路的潜力，为后续机制研究提供了明确的物质靶点。

体外抗肿瘤活性

多肿瘤细胞模型验证

研究选取 6 种肿瘤细胞（A549、HCT116、HepG2、HeLa、T24）及正常细胞 HEK293，采用 CCK-8 法评估 桑黄多酚 的增殖抑制活性。结果显示：

浓度依赖性抑制：PBP 对 A549（肺癌细胞）和 HCT116（结肠癌细胞）的 IC50 值分别为49.1±0.5 μg/mL和54.2±0.7 μg/mL，显著低于其他肿瘤细胞。

正常细胞安全性：在 10¹³~10¹⁹ μg/mL 浓度范围内，桑黄多酚 对 HEK293 细胞无显著毒性，体现了其潜在的治疗窗口优势。

注：数据显示 A549 和 HCT116 细胞对 PBP 最为敏感，IC50 值低于其他肿瘤细胞

细胞形态学观察

相差显微镜下，PBP 处理的 A549 和 HCT116 细胞呈现典型凋亡特征：细胞皱缩、膜泡形成、核固缩，且随浓度升高（20~80 μg/mL），凋亡形态学改变呈剂量依赖性加剧，进一步佐证了 PBP 的促凋亡作用。

作用机制：多靶点协同诱导肿瘤细胞死亡

诱导细胞凋亡与周期阻滞

通过 Annexin V-FITC/PI 双染法及流式细胞术分析，发现 PBP 处理后：

早期凋亡率显著升高：A549 细胞早期凋亡率从对照组的 5.20% 升至 80 μg/mL 处理组的 25.42%，HCT116 细胞从 8.83% 升至 65.35%（图 3A）。

S 期阻滞：A549 细胞 S 期比例从 9.35% 升至 24.67%，HCT116 细胞从 32.20% 升至 64.71%，提示 PBP 通过抑制 DNA 合成期进程，阻断肿瘤细胞分裂。

注：流式细胞术检测显示凋亡细胞比例及 S 期细胞占比随药物浓度增加而升高

氧化应激与线粒体通路调控

ROS 水平升高：DCFH-DA 荧光探针检测显示，PBP 处理后 A549 和 HCT116 细胞内活性氧（ROS）水平分别升高 1.8 倍和 2.3 倍，过量 ROS 诱导 DNA 损伤及线粒体功能紊乱。

线粒体膜电位去极化：JC-1 染色显示，PBP 导致线粒体膜电位（MMP）显著下降，表现为红色荧光减弱、绿色荧光增强，提示线粒体通透性转换孔开放，触发细胞色素 C 释放及 caspase 级联反应。

信号通路潜在靶点

结合成分分析与功能实验，推测 PBP 可能通过以下途径发挥作用：

氧化应激相关通路：Hispidin 等成分通过 Nrf2/ARE 通路调节抗氧化酶活性，诱导过量 ROS 生成；

细胞周期调控：抑制 Cyclin-CDK 复合物活性，阻滞细胞周期于 S 期；

线粒体凋亡通路：通过 Bax/Bcl-2 蛋白失衡，促进线粒体膜通透性改变，激活 caspase-3/9 凋亡执行因子。

结论

桑黄多酚的抗肿瘤研究展现了天然产物在药物开发中的独特优势 —— 多成分、多靶点、低毒性。该研究不仅深化了对桑黄药用价值的认知，更构建了 “天然产物成分鉴定 - 体外药效 - 机制解析” 的完整研究范式，为真菌来源多酚类化合物的抗肿瘤研究提供了可借鉴的方法论。随着后续体内研究与转化医学的推进，桑黄多酚有望成为抗肿瘤药物研发的新增长点，为癌症治疗提供更安全有效的候选药物。

★ 本文章由千济方桑黄医学研究院整理，仅供学术交流，欢迎指正。

来源：千济方