抗体芯片助力凋亡、应激信号通路研究

摘要：细胞凋亡：细胞凋亡是一种程序性细胞死亡(PCD)，其特征包括细胞皱缩、染色质凝聚、膜起泡和核碎裂。它对于形成和维持健康组织至关重要。细胞应激：细胞应激是生物体为应对外界环境刺激或内部稳态失衡所触发的一系列分子调控过程。

1、什么是细胞凋亡、细胞应激？

细胞凋亡：细胞凋亡是一种程序性细胞死亡(PCD)，其特征包括细胞皱缩、染色质凝聚、膜起泡和核碎裂。它对于形成和维持健康组织至关重要。
细胞应激：细胞应激是生物体为应对外界环境刺激或内部稳态失衡所触发的一系列分子调控过程。

二者有什么联系？严重的细胞应激可导致细胞凋亡！

2、凋亡信号通路有哪些？

（1）p53信号通路（DNA损伤响应与凋亡调控）

p53被誉为“基因组守护者”，当细胞发生DNA损伤时，p53会被ATM/ATR激酶激活（通过磷酸化修饰），进而通过两种途径诱导细胞凋亡：①转录激活作用：p53可上调BH3-only蛋白（如Puma、Noxa）、死亡受体（如Fas）及凋亡相关基因（如Bax）的表达，分别激活内源性与外源性凋亡通路；②非转录作用：p53直接进入线粒体，与抗凋亡蛋白Bcl-2/Bcl-xL结合，释放Bax/Bak，最终促进线粒体损伤。

（2）PI3K-AKT-mTOR信号通路（营养感知与凋亡抑制）

该通路是细胞感知营养信号与调控生长的核心通路，正常生理状态下的作用机制为：PI3K激活后催化生成PIP3，PIP3进一步招募AKT至细胞膜并使其激活；激活的AKT通过磷酸化修饰抑制BH3-only蛋白（例如Bad被磷酸化后，会与细胞质锚定蛋白结合，无法激活Bax），同时可磷酸化并抑制GSK-3β、FoxO等转录因子，减少凋亡相关基因的表达；而mTOR作为AKT的下游分子，能通过调控蛋白质合成维持细胞存活。当该通路受到抑制（如肿瘤治疗中使用PI3K抑制剂）时，AKT活性下降，其对凋亡的抑制作用随之解除，细胞更易发生凋亡。

（3）NF-κB信号通路（炎症与凋亡的双向调控）

NF-κB是调控炎症反应的核心转录因子，且对细胞凋亡具有“双向调控”作用：①抗凋亡作用：在TNF-α刺激下，NF-κB被激活，可上调抗凋亡基因（如Bcl-2、c-IAP、FLIP）的表达，从而抑制TNF-α诱导的细胞凋亡；②促凋亡作用：在持续炎症或DNA损伤条件下，NF-κB则能上调促凋亡基因（如FasL、TRAIL、Puma）的表达，促进细胞凋亡，以避免受损细胞发生癌变。

3、细胞应激与凋亡相关的信号通路有哪些？

细胞应激与凋亡相关的信号通路，核心涵盖 MAPK 通路、内源性线粒体通路、外源性死亡受体通路及内质网应激通路等；这些通路并非独立作用，而是通过构建复杂的调控网络相互协同，在细胞面临应激时精准调控 —— 或维系细胞正常稳态，或启动程序性死亡程序，以保障细胞命运的合理选择。

4、抗体芯片的原理、介绍

抗体芯片(Anti-Array)技术被称为高通量“WB”，可以用于检测某一特定的生理或病理过程相关蛋白的表达丰度，目前主要用于信号转导、蛋白组学、肿瘤及其他疾病的相关研究，具有微型化、集成化、高通量的特点。

抗体芯片原理：把能和不同抗原特异性结合的多种抗体高密度地固定到载体上，使待测样品通过芯片表面，经过洗脱把非特异性结合的蛋白洗掉，从而对特异性结合在上面的抗原进行检测。

抗体芯片适合于项目机制研究中初筛！！！

5、抗体芯片助力细胞凋亡、细胞应激的研究

货号/名称

检测指标

LXAH036-1

人细胞凋亡抗体芯片Panel(36因子)

Bad,TRAIL R1/DR4,PON2,Bax,TRAIL R2/DR5,p21/CIP1/CDNK1A,Bcl-2,FADD,p27/Kip1,Bcl-x,Fas/TNFSF6,Phospho-p53 (S15),Pro-Caspase-3,HIF-1 alpha,Phospho-p53 (S46),Cleaved Caspase-3,HO-1/HMOX1/HSP32,Phospho-p53 (S392),Catalase,HO-2/HMOX2,Phospho-Rad17 (S635),cIAP-1,HSP27,Pro-Caspase-3,cIAP-2,HSP60,SMAC/Diablo,Claspin,HSP70,Survivin,Clusterin,HTRA2/Omi,TNF RI/TNFRSF1A,Cytochrome c,Livin,XIAP

LXAH026-1

人细胞应激抗体芯片Panel(26因子)

ADAMTS1,HIF-2 alpha,Phospho-p38 alpha (T180/Y182),Bcl-2,Phospho-HSP27 (S78/S82),Phospho-p53 (S46),Carbonic Anhydrase IX,HSP60,PON1,Cited-2,HSP70,PON2,COX-2,IDO,PON3,Cytochrome c,Phospho-JNK Pan (T183/Y185),Thioredoxin-1,Dkk-4,NFkappaB1,SIRT2,FABP1/L-FABP,p21/CIP1,SOD2,HIF-1 alpha,p27/Kip1

小鼠细胞凋亡抗体芯片Panel(21因子)

Bad,Fas/TNFRSF6/CD95,MCL-1,Bcl-2,HIF-1α,p27/Kip1,Bcl-x,HO-1/HMOX1/HSP32,p53,Cleaved Caspase-3,HO-2/HMOX2,SMAC/Diablo,Catalase,HSP27,TNF RI/TNFRSF1A,Claspin,HSP60,TRAIL R2/TNFRSF10B,Cytochrome c,HSP70/HSPA1A,XIAP

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