摘要:每一块奶酪背后都藏着一个 “凝固魔法”—— 凝乳酶。这种能让液态牛奶变成固态凝乳的关键酶,曾长期依赖牛胃提取,但供应有限、成本高;后来用微生物生产,又面临特异性低、奶酪发苦的问题。如今,瑞典科学家团队在《Plant Biotechnology Journal》
每一块奶酪背后都藏着一个 “凝固魔法”—— 凝乳酶。这种能让液态牛奶变成固态凝乳的关键酶,曾长期依赖牛胃提取,但供应有限、成本高;后来用微生物生产,又面临特异性低、奶酪发苦的问题。如今,瑞典科学家团队在《Plant Biotechnology Journal》(2025 年)发表的研究,给奶酪行业带来了 “绿色革命”:他们让本氏烟草叶子变成了 “凝乳酶生产工厂”,不仅产量高,还意外发现删除酶里一个 “小片段” 后,凝乳效率直接翻了 3 倍!
烟草生产凝乳酶
奶酪制作的核心一步,是让牛奶中的酪蛋白凝固。传统上,人们用牛胃里的 “牛凝乳酶” 来完成这件事,但它有三大痛点:
供应有限:全球奶酪需求激增,牛凝乳酶产量跟不上;伦理争议:提取凝乳酶需宰杀小牛,不符合素食和动物保护理念;替代方案不给力:微生物生产的凝乳酶(如毛霉蛋白酶)对酪蛋白特异性低,容易让奶酪发苦;而地中海地区常用的刺棘蓟花提取物(含赛普罗辛 B 等天冬氨酸蛋白酶),虽能天然凝乳,但野生蓟花采摘不稳定、酶含量波动大,无法满足工业需求。简单说:行业急需一种 “产量高、活性强、来源环保” 的凝乳酶 —— 这正是科学家们要解决的问题。
研究团队瞄准了两个关键问题,堪称 “植物造酶” 的 “灵魂拷问”:
植物能当 “凝乳酶工厂” 吗? 本氏烟草是常用的植物生物反应器(能生产抗体、疫苗等),但它能高效生产有功能的赛普罗辛 B 吗?酶里的 “特殊片段” 有啥用? 赛普罗辛 B 里有个植物特有的 “插入片段”(PSI 结构域,104 个氨基酸),动物和微生物的凝乳酶都没有它。这个 PSI 到底是 “帮手” 还是 “累赘”?对酶的活性、产量、在细胞里的 “住址”(亚细胞定位)有影响吗?为了回答这些问题,团队设计了一套 “对比实验”,步骤通俗讲就是 “造酶→提酶→测酶”:
造两种酶:在实验室构建两个基因载体 —— 一个携带 “全长赛普罗辛 B”(CYPB,含 PSI),另一个携带 “删除 PSI 的赛普罗辛 B”(CYPBΔPSI);让烟草干活:用农杆菌 “注射” 烟草叶子(农杆菌会把酶基因 “送” 进烟草细胞),让烟草在 15 天内 “瞬时表达” 酶(相当于给烟草一个临时任务,快速造酶);提取并检测:看 “基因表达”:用 qRT-PCR 测两种酶的基因转录水平,看哪个转录更快;看 “蛋白产出”:用 Western blot 确认酶被成功制造,再用 IMAC 方法提纯酶,称重算产量;测 “酶的性能”:比如最适 pH、温度(工业生产需要稳定的反应条件),用 FITC - 酪蛋白测酶活,用脱脂牛奶测凝乳时间;找 “酶的住址”:给酶加荧光标签,用共聚焦显微镜看酶在烟草细胞里的位置(是在液泡、内质网还是其他地方)。酶活:CYPBΔPSI 的酶活是 168IU/mg,是全长 CYPB(57IU/mg)的3 倍;凝乳速度:CYPBΔPSI 让牛奶凝固只需 3 分 15 秒,比全长 CYPB(5 分 30 秒)快近一半;定位秘密:PSI 的真正作用是 “运输”—— 带 PSI 的 CYPB 会被运到液泡和内吞小泡(这些地方能保护酶不被降解),而没 PSI 的 CYPBΔPSI 会被困在内质网和液泡膜上。简单说:PSI 是酶的 “细胞快递员”,负责把酶送到 “安全仓库”(液泡),但它对酶的 “凝固能力” 没帮助,删掉反而让酶更 “能干”。
提纯的酶有稳定的工业属性:
最适 pH 为 4.6(奶酪制作常用酸性环境),最适温度 47℃(接近工业生产的反应温度);能被天冬氨酸蛋白酶特异性抑制剂(pepstatin A)抑制 —— 证明它和天然赛普罗辛 B 功能一致,没有 “失活” 或 “变异”。植物来源的凝乳酶解决了 “供应不稳定” 问题:烟草生长快、易规模化种植(可在温室批量生产),且酶活性高、凝乳快 —— 未来奶酪厂可能不用依赖动物或微生物,靠 “种烟草” 就能稳定获取凝乳酶,还能降低生产成本(植物培养比微生物发酵更节能)。
本氏烟草再次证明自己是 “万能蛋白工厂”—— 除了凝乳酶,未来还能用来生产其他工业酶(如洗涤剂用酶、食品加工酶)或药用蛋白(如抗体、疫苗),比微生物更安全(植物蛋白修饰更接近人类),比动物更环保(不占用大量耕地,碳排放低)。
植物来源的凝乳酶符合素食、环保趋势,能满足消费者对 “清洁标签” 食品的需求(比如欧盟对 GMO 的严格规定,植物瞬时表达更容易通过审批)。
从 “烟草叶子造凝乳酶” 到 “酶活性翻 3 倍”,这项研究不仅解决了奶酪行业的百年难题,更让我们看到 “植物生物反应器” 的巨大潜力 —— 未来,或许我们吃的奶酪、用的洗涤剂、甚至注射的疫苗,都能从一片绿叶中诞生。
正如研究团队所说:“植物不仅能提供食物,还能成为‘蛋白生产车间’,这是可持续生物技术的未来方向。” 而这一切,可能就从一块用烟草凝乳酶做的奶酪开始。
来源:农科最前线一点号