摘要：S-腺苷甲硫氨酸（SAM）是一种甲基供体，参与将甲基转移至DNA、蛋白质、磷脂、RNA和神经递质。分解和再生SAM的反应被称为SAM循环。SAM依赖的甲基化酶使用SAM作为底物，生成S-腺苷同型半胱氨酸（SAH），随后SAH被S-腺苷同型半胱氨酸水解酶进一步分

S-腺苷甲硫氨酸（SAM）是一种甲基供体，参与将甲基转移至DNA、蛋白质、磷脂、RNA和神经递质。分解和再生SAM的反应被称为SAM循环。SAM依赖的甲基化酶使用SAM作为底物，生成S-腺苷同型半胱氨酸（SAH），随后SAH被S-腺苷同型半胱氨酸水解酶进一步分解为同型半胱氨酸和腺苷。同型半胱氨酸可以通过蛋氨酸合成酶重新生成蛋氨酸，最终再次生成SAM。

SAM甲基基团的转移将SAM转化为SAH，后者是一种强效的甲基化抑制剂。因此，SAM/SAH比值被用作衡量细胞甲基化潜力的指标。研究表明，冠状动脉疾病患者的全血SAM水平低于正常人。内皮依赖性血管舒张与SAM水平的增加相关。此外，在非糖尿病个体中，高SAM水平与颈动脉内膜中层厚度的减少有关。

艾美捷S-腺苷甲硫氨酸(SAM)ELISA试剂盒（#MET-5152）是一种竞争性酶免疫分析方法，用于检测和定量血浆、血清、裂解液或其他生物液体样本中的SAM。该试剂盒对游离SAM的检测灵敏度限为0.625纳摩尔/升。每套试剂盒提供的试剂足以进行多达96次测定，包括标准曲线和未知样本。

相关产品：

1. MET-5151-C：S-腺苷甲硫氨酸（SAM）和S-腺苷同型半胱氨酸ELISA组合试剂盒

2. MET-5090：腺苷测定试剂盒（荧光法）

3. MET-5158：蛋氨酸测定试剂盒（荧光法）

4. MET-5163：ATP测定试剂盒（荧光法）

5. MET-5125：丙酮酸测定试剂盒（比色法）

S-腺苷甲硫氨酸(SAM)ELISA试剂盒组成：

盒子1（室温运输）

1. 96孔蛋白结合板（部件编号231001）：一个96孔条板。

2. 二抗，HRP偶联物（1000倍）（部件编号230003）：一个20微升小瓶。

3. 测定稀释液（部件编号310804）：一个50毫升瓶。

4. 10倍洗涤缓冲液（部件编号310806）：一个100毫升瓶。

5. 底物溶液（部件编号310807）：一个12毫升琥珀色瓶。

6. 终止液（部件编号310808）：一个12毫升瓶。

盒子2（干冰运输）

1. SAM偶联物（100倍）（部件编号267201）：一个100微升小瓶。

2. SAM标准品（部件编号51521D）：一个40微升小瓶，含有1.2微摩尔/升稳定形式的游离S-腺苷甲硫氨酸。

3. 抗SAM抗体（500倍）（部件编号267202）：一个15微升小瓶。

未提供的材料：

1. 磷酸盐缓冲液（PBS）

2. 含0.1%牛血清白蛋白（BSA）的PBS

储存条件：

收到后，将SAM偶联物和SAM标准品储存于-80摄氏度。将试剂盒中的其他组分储存于4摄氏度。

试剂准备：

- SAM偶联物包被板：确定所需孔数，将SAM偶联物在PBS中稀释1:100。向96孔蛋白结合板的每个孔中加入100微升1倍SAM偶联物。在4摄氏度下孵育过夜。移除稀释后的SAM偶联物，用纸巾吸干孔中的多余液体。用200微升PBS洗涤孔3次，并用纸巾吸干多余液体。向每个孔中加入200微升测定稀释液，并在室温下封闭1小时。将板转移到4摄氏度，直到开始测定。

注意：SAM偶联物包被板不能长期稳定保存。建议在包被后24小时内使用。

- 1倍洗涤缓冲液：用去离子水将10倍洗涤缓冲液稀释至1倍。搅拌至均匀。

- 抗SAM抗体和二抗HRP偶联物：使用前，用测定稀释液将抗SAM抗体稀释1:500，二抗HRP偶联物稀释1:1000。不要储存稀释后的溶液。

样本准备：

以下建议仅供参考，可根据用户实验设计进行调整以优化结果。

- 血浆：用肝素或EDTA收集血液，并在4摄氏度下以1000×g离心10分钟。移取血浆并立即进行测定，或在-80摄氏度下保存，最长可达三个月。正常血浆样本应在进行ELISA前立即用含0.1% BSA的PBS稀释2-10倍。

- 血清：收集血清，并在4摄氏度下以1000×g离心10分钟。立即进行测定，或在-80摄氏度下保存，最长可达三个月。正常血清样本应在进行ELISA前立即用含0.1% BSA的PBS稀释2-10倍。

- 组织匀浆：称重并在冰上将组织在每克组织5-10毫升冷PBS中匀浆。在4摄氏度下以10,000×g离心15分钟。移取上清液并置于冰上。将未使用的上清液在-80摄氏度下保存，最长可达三个月。

- 细胞裂解液：通过在4摄氏度下以2000×g离心10分钟收集细胞。在冰上用1-2毫升冷PBS超声处理或匀浆细胞沉淀。在4摄氏度下以10,000×g离心15分钟。移取上清液并置于冰上。将上清液分装后用于测定。将未使用的上清液在-80摄氏度下保存，最长可达三个月。

- 其他生物液体：在4摄氏度下以1000×g离心10分钟，并回收上清液。立即进行测定，或在-80摄氏度下保存，最长可达三个月。

结果示例：

下图展示了SAM ELISA试剂盒的典型结果。以下数据仅供参考，不应用于解释实际结果。

图上：SAM标准曲线。

图下：人血清和血浆中SAM的检测。

S-腺苷甲硫氨酸(SAM)ELISA试剂盒文献参考：

1. Hirsch S, Ronco AM, Guerrero-Bosagna C, de la Maza MP, Liva L, Barrera G, Llanos M, Alliende

MA, Silva F, and Bunout D (2008) Nutrition. 11-12:1103-1109.

2. Pey AL, Majtan T, Sanchez-Ruiz JM, and Kraus JP (2013) Biochem J. 449: 109-121

3. Yi P, Melnyk S, Pogribna M, Pogribny IP, Hine RJ, and James SJ (2000) J. Biol. Chem.275:29318-29323.

4.Stabler SP and Allen RH (2004) Clin. Chem. 50: 365-372.

来源：饭盒尽头的幽灵