即用型丽春红染色液，荧光染料在科研中具有的优势及应用

摘要：丽春红本身带负电荷，可以与带正电荷的氨基酸残基结合，同时也能与蛋白的非极性区相结合，从而形成红色的清晰条带。而且丽春红对蛋白的染色是可逆的，染色后可以用蒸馏水，PBS 或其它适当溶液洗去，不会对后续实验产生影响。本品常用于 PVDF 膜、硝酸纤维素膜 (Nni

丽春红本身带负电荷，可以与带正电荷的氨基酸残基结合，同时也能与蛋白的非极性区相结合，从而形成红色的清晰条带。而且丽春红对蛋白的染色是可逆的，染色后可以用蒸馏水，PBS 或其它适当溶液洗去，不会对后续实验产生影响。本品常用于 PVDF 膜、硝酸纤维素膜 (Nnitrocellulose Membrane) 和醋酸纤维素膜 (Cellulose Acetate Membrane) 上的蛋白的检测。

即用型丽春红染色液的核心成分是丽春红 S，它属于酸性偶氮染料而非荧光染料。作为 Western Blot 实验中转膜后常用的蛋白染色试剂，其相比荧光染料以及传统非即用型染色液，在实验操作、流程适配、成本安全等方面优势显著，具体如下：

即开即用，操作门槛极低：该染色液是预配好的工作液，无需实验人员额外稀释、调配，开瓶就能直接用于 PVDF 膜、硝酸纤维素膜等多种印迹膜的蛋白染色。既省去了试剂配制的时间与计算误差，也避免了传统染色液调配时可能出现的浓度不当、成分比例失衡等问题，新手也能轻松操作，同时还能保障不同批次实验结果的一致性。染色可逆，不干扰后续实验：这是其核心优势之一。它与蛋白的结合并非不可逆，染色后用蒸馏水、PBS 或 TBST 溶液简单漂洗，就能彻底洗脱膜上的染料，不会残留影响后续的抗体孵育、信号检测等 WB 关键步骤。而荧光染料若残留，可能会与抗体标记物产生荧光干扰，影响检测结果准确性；传统考马斯亮蓝染液染色后还需复杂脱色，且部分残留可能影响蛋白活性。快速显色，适配实验质控需求：将印迹膜浸泡在染色液中 1 - 15 分钟，再经蒸馏水漂洗后就能观察到清晰的红色蛋白条带。这种快速显色的特点，能让实验人员在 WB 实验早期快速确认蛋白是否成功转膜、转膜是否均匀，及时排查电泳或转膜环节的问题，避免后续耗费大量时间和抗体做无效实验。而荧光染色不仅需要特定激发条件，还常需更长孵育时间才能观察结果。成分安全，保存与使用成本低：其成分无特殊有毒物质，仅需常规佩戴手套、穿实验服操作即可，无需像部分荧光染料那样需避光防护，也不用特殊废液处理流程。且它可室温保存，多数产品室温下保质期长达一年，无需冷藏冷冻设备；同时试剂本身价格亲民，相比价格昂贵的荧光染料，以及需要搭配紫外 / 激光成像仪的荧光检测方案，能大幅降低实验的耗材和设备成本。适配性广，显色效果稳定：能适配 PVDF 膜、硝酸纤维素膜、醋酸纤维素膜等 WB 实验中常用的多种印迹膜，通过与蛋白中带正电的氨基酸残基及非极性区结合，形成稳定的红色条带，背景干扰浅，便于清晰分辨蛋白条带的位置和分布。此外其水溶性强、染液稳定性高，可多次短期使用，不会轻易出现沉淀或显色能力下降的情况

即用型丽春红染色液的核心用于 Western Blot（WB）实验的转膜质控，同时适配少量蛋白相关辅助检测场景，具体应用领域如下：

核心应用：Western Blot 转膜质控

转膜有效性验证：WB 实验中，将染色液直接浸泡转膜后的印迹膜（PVDF 膜、硝酸纤维素膜等），1-15 分钟即可显色，快速确认目标蛋白是否从凝胶成功转移到膜上，避免因转膜失败（如膜反转、电压 / 时间不当）导致后续抗体孵育、发光检测等步骤无效。

转膜均匀性检测：通过观察红色蛋白条带的分布情况，判断蛋白转膜是否均匀（如有无局部未转印、条带拖尾 / 扭曲），排查电泳缓冲液失效、凝胶气泡等问题，保障后续定量分析的准确性。

蛋白上样量参考：借助条带亮度初步判断上样量是否合适，若条带过浅或过浓，可及时调整后续实验的上样量或抗体稀释比例，减少重复实验。

辅助应用：蛋白相关基础检测

印迹膜回收与复用：染色后经蒸馏水或缓冲液漂洗可彻底洗脱染料，不影响膜上蛋白活性，可用于同一膜的多次抗体孵育（如先检测靶蛋白，洗脱后再检测内参蛋白），节省珍贵样本和实验耗材。

蛋白条带定位辅助：在质谱鉴定等后续实验中，可通过丽春红染色快速定位膜上目标蛋白条带，便于精准切取条带进行后续分析，避免切取误差导致的样本浪费。

实验教学与新手实操：适配高校生物化学、分子生物学实验教学，显色快速、结果直观，帮助学生理解 WB 转膜原理，同时简化操作流程，降低新手实验失败率。

特殊场景：低风险蛋白检测补充

无抗体时的蛋白存在性验证：若暂时缺乏目标蛋白的特异性抗体，可通过丽春红染色初步确认样本中是否存在蛋白（如重组蛋白纯化产物、细胞裂解液总蛋白），为后续实验规划提供参考。

实验耗材兼容性测试：用于验证新采购的印迹膜、转膜缓冲液等耗材的性能，通过标准蛋白 Marker 的显色效果，判断耗材是否符合 WB 实验要求，保障实验重复性。