摘要：卵巢癌是妇科恶性肿瘤的“头号杀手”，具有高复发率和死亡率，严重威胁全球女性的生命健康。近年来，聚腺苷二磷酸核糖聚合酶抑制剂（PARPi），尤其是尼拉帕利，在卵巢癌治疗中得到了广泛应用。然而，尽管PARPi在初始治疗中表现出良好的疗效，但大多数患者最终仍会产生耐
卵巢癌是妇科恶性肿瘤的“头号杀手”，具有高复发率和死亡率，严重威胁全球女性的生命健康。近年来，聚腺苷二磷酸核糖聚合酶抑制剂（PARPi），尤其是尼拉帕利，在卵巢癌治疗中得到了广泛应用。然而，尽管PARPi在初始治疗中表现出良好的疗效，但大多数患者最终仍会产生耐药性，这成为了当前卵巢癌治疗的瓶颈。因此，深入探究PARPi耐药机制并找到应对策略，是攻克卵巢癌治疗难题的关键。
超级增强子（Super-enhancers，SEs）作为一类具有强大转录激活能力的顺式调控元件，可通过招募转录因子促进靶基因高效表达。研究表明，超级增强子可能通过诱导癌基因表达参与卵巢癌进展和耐药性，然而，其在卵巢癌尼拉帕利耐药的作用机制尚未阐明。
2025年3月19日，广州医科大学附属第三医院赵杨教授团队在（IF=27.7）上发表了题为“”的研究论文。本研究首次揭示了乳酸积累导致组蛋白乳酰化（H4K12la），从而上调超级增强子介导的RAD23A异常表达并促进卵巢癌细胞对尼拉帕利的耐药性，为卵巢癌尼拉帕利耐药提供了潜在治疗靶点。景杰生物为该研究提供乳酰化修饰泛抗体以及组蛋白位点特异修饰抗体支持。
1、RAD23A与卵巢癌预后不良相关
研究人员通过RIC-seq分析发现，在尼拉帕利耐药的卵巢癌细胞中，超级增强子区域与多个靶基因启动子相互作用，其中与RAD23A启动子的相互作用最为显著。暗示RAD23A（一种核苷酸切除修复因子）可能是尼拉帕利耐药的关键靶基因。
研究人员进一步分析了RAD23A在耐药细胞中的表达水平。结果显示，耐药细胞中RAD23A的mRNA和蛋白水平显著高于非耐药细胞。此外，通过分析公共数据库中的卵巢癌数据集，发现RAD23A在卵巢癌组织中的表达水平显著升高，并且其高表达与患者预后不良相关。
2、RAD23A参与卵巢癌尼拉帕利耐药过程
为了评估RAD23A的功能，研究人员利用小干扰RNA技术敲低RAD23A的表达。结果发现，与对照组相比，RAD23A敲低后耐药细胞对尼拉帕利的敏感性显著增加，细胞增殖能力显著降低。体内模型和类器官模型实验也得到了类似的结果，这充分表明靶向RAD23A可以有效逆转卵巢癌对尼拉帕利的耐药。
RAD23A是核苷酸切除修复通路中的一个重要组分，参与早期DNA损伤信号的识别和修复。研究人员通过免疫荧光等实验评估其在尼拉帕利耐药细胞中的DNA损伤修复能力。结果显示，RAD23A过表达能够显著降低DNA损伤标志物γ-H2AX的表达水平，并减少DNA损伤程度，而敲低RAD23A则显著增加DNA损伤。体内小鼠模型也表现出类似的效应，表明RAD23A通过调节DNA损伤修复参与卵巢癌对尼拉帕利的耐药过程。
3、超级增强子调控RAD23A的表达
为了明确RAD23A在化疗耐药中的表观遗传调控机制，研究人员通过生物信息学分析预测可能参与RAD23A转录调控的转录因子，并利用CRISPR-Cas9技术敲除了超级增强子区域的两个关键增强子E1和E2。结果发现，RAD23A表达显著降低，且E1和E2联合敲除后，RAD23A表达进一步下调。通过多种数据库预测以及ChIP-qPCR验证发现，E1和E2区域富集了多种转录因子，其中MYC的富集最为显著，表明MYC是参与RAD23A转录调控的关键转录因子。
进一步实验发现，敲除E1或E2能够显著增加耐药细胞对尼拉帕利的敏感性，抑制细胞增殖，加重DNA损伤程度。这些结果表明，超级增强子通过招募MYC等转录因子，激活RAD23A基因的转录，从而促进耐药细胞的增殖和DNA损伤修复能力。
4、H4K12la促进RAD23A的表达
糖酵解可驱动肿瘤细胞的恶性进展和耐药性。因此，研究人员评估了尼拉帕利耐药细胞中糖酵解的指标。结果显示，与非耐药细胞相比，耐药细胞的糖酵解活性显著增强。敲低糖酵解关键酶能够显著增加耐药细胞对尼拉帕利的敏感性，抑制细胞增殖并增加DNA损伤，而添加外源性乳酸则效应相反，表明糖酵解的激活及其导致的乳酸积累在卵巢癌尼拉帕利耐药中发挥了重要作用。
进一步研究发现，耐药细胞中组蛋白乳酰化水平显著增加，其中H4K12la变化最为显著。ChIP结果显示，H4K12la在RAD23A基因的启动子和增强子区域富集，并且这种富集在耐药细胞中更为显著。此外，敲除E1和E2能够显著降低H4K12la在RAD23A启动子区域的富集，而这种降低不能通过添加外源性乳酸恢复。这些结果表明，乳酸诱导的H4K12la通过激活超级增强子，促进RAD23A基因的转录和表达，增强细胞的DNA损伤修复能力，从而促进了对尼拉帕利耐药。
综上，本研究阐明了糖酵解和H4K12la在调节卵巢癌尼拉帕利耐药基因表达中的机制，为卵巢癌中尼拉帕利耐药的分子机制提供了见解，表明RAD23A是解决卵巢癌尼拉帕利耐药的新治疗靶点。
文章所用景杰抗体产品
该研究首次明确了RAD23A在尼拉帕利耐药中的关键作用，并通过体外、体内及类器官模型验证了靶向RAD23A能够有效逆转卵巢癌的耐药性。这不仅为卵巢癌耐药机制的研究提供了新的靶点，还为开发新的治疗策略提供了重要的实验依据。RAD23A是否具有潜在的普适性作用机制还需拓展研究。
值得一提的是，该研究以“超级增强子在肿瘤耐药过程中的作用”为研究角度切入，通过RIC-seq技术，结合公共增强子数据，获得了尼拉帕利耐药的卵巢癌细胞中超级增强子与靶基因启动子的相互作用图谱。超级增强子比普通增强子具有更强的转录激活相关组蛋白修饰及转录因子富集密度，在癌症发生、细胞分化、免疫应答等重要生物学过程中发挥着重要调控功能，具有重要研究价值。
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来源：景杰生物
