摘要：亚硝胺类杂质是含有下列结构的胺类化合物，这类化合物通常仅在仲或叔胺和亚硝酸盐存在下，在酸性反应条件下，才可能形成N-亚硝胺。随着全球监管机构对药物中亚硝胺杂质的关注显著提升，许多药企也在建立全生命周期的风险控制体系中迎来检测灵敏度不足、方法学开发难等痛点。

亚硝胺类杂质是含有下列结构的胺类化合物，这类化合物通常仅在仲或叔胺和亚硝酸盐存在下，在酸性反应条件下，才可能形成N-亚硝胺。随着全球监管机构对药物中亚硝胺杂质的关注显著提升，许多药企也在建立全生命周期的风险控制体系中迎来检测灵敏度不足、方法学开发难等痛点。

PART/ 01 亚硝酸类杂质

亚硝酸（HNO2）本身不稳定，但可以在酸性条件下由亚硝酸盐（NO2-）形成。亚硝酸盐（NO2-）和硝酸（HNO3）并不是直接有效的亚硝化剂，而是在弱酸性条件下形成更具反应性的NO+载体（对于亚硝酸盐而言，特别是N2O3）。

亚硝酸盐的亚硝化取决于两个相反的pH效应的平衡-两个硝酸分子在低pH值下形成N2O3的反应和在较高pH值下胺的去质子化，该反应发生的最佳pH范围为2.5～3.4。反应速率与胺的浓度和亚硝酸盐的浓度的平方成正比。此外，某些含有二甲胺类结构的药物降解后可能氧化产生NDMA杂质。

PART/ 02 亚硝胺或其前体可能来源

依据EMA/409815/2020 Rev.21，结合企业自身实际情况评估，原料药生产中的7个风险因子及GMP相关的3个风险因子，评估以下亚硝胺或其前体可能出现的来源。[1]

与活性物质制造相关的风险因素

01.在制造过程的相同或不同步骤中，在仲胺或叔胺的存在下使用亚硝酸盐和酯或其他亚硝化剂。

02.在制造过程的相同或不同步骤中，在仲胺或叔胺的存在下，羟胺氧化形成亚硝酸盐或硝基芳香族前体释放亚硝酸盐。

03.在制造过程的相同或不同步骤中，在仲胺或叔胺存在的情况下使用消毒水。

04.在制造过程中或储存过程中，次氯酸盐、空气、氧气、臭氧和过氧化物对肼、酰肼和腙的氧化。

05.API生产过程中使用受污染的原材料、回收材料或回收材料。

06.使用可能含有残留亚硝胺或亚硝化剂的工艺或原材料的供应商提供的受污染的起始材料和中间体。

07.在制造过程中故意产生的亚硝胺的残留。

与成品相关的风险因素

08.原料药或其杂质/降解物中的可亚硝化氮官能团与配方或储存过程中FP成分中存在的亚硝化剂的反应。

09.活性物质的降解过程，包括由固有反应性引起的降解过程或外源亚硝化剂的存在。

10.在活性物质制造过程中或储存过程中，活性物质或其杂质/降解物中存在的肼或其他含胺官能团的氧化。

11.使用某些包装材料。

12.从季铵阴离子交换树脂中浸出的胺与液相中存在的亚硝化剂的反应。

与GMP相关的风险因素

13.同一生产线上连续运行不同工艺造成的交叉污染。

14.由于操作员相关错误或批次记录不够详细，如后处理过程中相分离不足，导致工艺步骤之间杂质的遗留。

15.使用受污染的回收或再循环材料。

全球监管机构（如FDA、EMA、USP等）对亚硝胺杂质的检测提出了严格要求，包括建立灵敏的检测方法、制定合理的限度标准以及进行风险评估。微源检测实验室积累丰富基因毒性杂质研究经验，完结亚硝胺等百余项基因毒性杂质检测项目，积累了警示结构的分析方法。

可为基因毒性杂质研究提供工艺评估、控制策略制定、分析方法开发、验证及放行检测等一站式解决方案。针对工艺进行全面评估，结合毒理学数据分析和法规解读，制定合理的控制策略，出具完整的评估及控制分析报告。服务多家企业，符合各种法规要求，帮助不同品种的研究资料申报成功。

参考文献：[1] EMA/409815/2020 Rev.21

来源：健康活你我他