摘要：在细胞培养实验室中，预防支原体污染可能是一项艰巨的任务。但是，您可以选择易于清洁的移液器以及无菌耗材并定期检测，通过执行良好的细胞培养规范，从而显著降低细胞培养实验室的支原体污染及传播风险。
在细胞培养实验室中，预防支原体污染可能是一项艰巨的任务。但是，您可以选择易于清洁的移液器以及无菌耗材并定期检测，通过执行良好的细胞培养规范，从而显著降低细胞培养实验室的支原体污染及传播风险。
您可以通过以下操作规程进行无污染的细胞培养：
1实施良好细胞培养规范
《良好的细胞培养规范》中的关键指导原则包括：一次只培养一个细胞系；清晰标记用于细胞培养工作的移液器、移液助吸器及移液器吸头；仅在细胞培养实验室使用这些移液器和吸头；禁止将其从细胞培养实验室转移到另一个实验室，然后再转移回来。只能使用专为细胞培养工作指定的试剂，不得使用专用于其他应用的储备溶液。
2选择易于清洁且可高压灭菌的移液器用于细胞培养工作
液体溢漏和飞溅是造成污染的主要来源，而移液器和液体处理控制器的维护在降低这类污染风险方面发挥着重要的作用。实验室应针对定期的去除污染和维护作业制定相关指南和方案。去除细菌污染的有效清洁方法包括：
高压灭菌
碱性清洁剂
乙醇过氧化氢蒸汽VHP
3选择带有防护包装的无菌滤芯吸头
滤芯吸头是细胞培养工作中最安全的选择，因其为样本和移液器提供了最好的防护，并且可以防止支原体通过气溶胶传播。
4定期检测
定期检测所有细胞系的支原体污染情况，尤其是新细胞系。将新细胞系隔离在单独的培养箱中，直到可以明确证明其未受支原体污染。
5使用 0.1 μm的滤器过滤
高压灭菌是杀死支原体的有效方法，但不适用于某些培养基和试剂，因为高温会破坏许多营养素和生长因子。对于细胞大小为 0.2 - 0.8 μm且可通过孔径大于 0.1 μm孔的支原体而言，能有效防止细菌和真菌通过的孔径为 0.22 μm的标准无菌过滤通常是不够的。因此，为防止支原体污染，在过滤细胞培养试剂和培养基时，应使用 0.1 μm孔径的无菌过滤器，而不是标准的 0.22 μm过滤器。
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孙子兵法
来源：健康伴长生