摘要：外泌体研究在肿瘤领域已经卷疯了，似乎每个课题都在「拼手速」、「拼表征」。但外泌体研究的潜力远不止于此，这些有趣又冷门的研究或许能打开你的思路：

外泌体研究在肿瘤领域已经卷疯了，似乎每个课题都在「拼手速」、「拼表征」。但外泌体研究的潜力远不止于此，这些有趣又冷门的研究或许能打开你的思路：

ACS Nano：姜黄重组纳米囊泡高效肥胖干预

集美大学的研究团队通过重组姜黄来源的纳米囊泡（Rec-tNVs），发现 Rec-tNVs 通过促进脂肪分解、抑制脂肪生成、诱导脂肪细胞棕色化及多通路触发凋亡，在细胞与动物模型中均表现出剂量依赖性降脂及抗肥胖效果。植物外泌体在此作为天然纳米递送载体，不仅高效包封姜黄素及其他活性成分，还通过其仿生特性增强靶向性为肥胖治疗提供了天然、多效的解决方案[1]。

Theranostics：大蒜特定成分可改善高脂饮食引起的肥胖

研究人员在口服给予高脂饮食小鼠大蒜外泌体样纳米颗粒（GaELNs），发现 GaELNs 可被小胶质细胞优先摄取，减轻神经炎症，改善肥胖小鼠的血糖响应、胰岛素敏感性和记忆功能。植物外泌体在此不仅实现活性脂质的定向递送，更通过其内容分子直接调控神经免疫和代谢途径，系统性干预肥胖及相关神经炎症[2]。

J Adv Res：生姜外泌体调节肠道菌群缓解肠道炎症

研究人员通过外泌体试剂盒结合差速离心法分离出生姜外泌体样纳米颗粒（GELNs），发现 GELNs 里的植物 miRNA ，能跨界调控宿主免疫，抑制炎症通路，减轻肠道炎症。研究不仅揭示植物-动物跨界调控机制，更为口服型抗炎制剂开发提供新思路[3]。

相比于动物外泌体，植物外泌体（PDNVs）看似冷门，但其来源广泛、成本低、免疫原性低、生物相容性好[4]。特别是像灵芝、鹿茸、人参等中药来源的外泌体这些年的研究进展更是频出，它们富含活性成分，在抗炎、免疫调节、组织修复等方面展现出明确潜力。

PDNVs 作用机制尚未完全明确，仍有很大的研究空间，但同时因为 PDNVs 研究样本间差异较大（有非常容易榨汁的葡萄，也有很黏的芦荟，也有半干的黄芪，也有特别不容易溶解的锁阳等），也存在提取与纯化标准化不足，不同方法（如超离心、超滤）导致其成分异质性高，保存稳定性差等问题。

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下面以植物囊泡提取纯化试剂盒（多汁植物）为例为您介绍提取方法和注意事项：

相关操作步骤：

一

榨汁前准备

1、榨汁机消毒：将榨汁机各部件拆分开，喷洒 75% 酒精仔细擦拭后，放入生物安全柜紫外消毒至少 20 min；

2、样品准备：按照试剂盒处理量准备待提取样品；

注：试剂盒处理量

3、样品处理：将新鲜的待提取植物洗净外表皮后，用无尘布擦干，放入生物安全柜紫外消毒至少 20 min后，将植物切成方便榨汁的小块；

注：

a. 皮厚的植物（如葛根）需要先洗净外皮、消毒后去皮切小块或削成薄片；
b. 皮薄的植物（如三七、地黄、姜黄）可以洗净外皮，消毒后直接切小块，准备榨汁。

二

榨汁

1、榨汁机准备：在生物安全柜下，将完成消毒的榨汁机部件按照榨汁机说明书组装；

2、榨汁：将切好的植物小块投入榨汁机榨汁，质地偏硬的植物注意少量多次，收集植物汁液，榨汁完成。

注：如需控制内毒素，榨汁过程请在生物安全柜内进行。

三

离心去杂

1、低速离心去杂：将榨汁后的汁液于 4 ℃，5,000 ×g，10 min 离心，收集上清；

2、高速离心去杂：将低速离心后收集的上清于 4 ℃，10,000 ×g，10 min 离心，收集上清。

四

提取囊泡

1、上清液预处理：在去除杂质后的植物汁液中加入混匀的 Solution A 试剂，添加剂量如下（其他剂量可按添加比例换算）：

注：Solution A 试剂使用前需混匀。

2、混合孵育：加入 Solution A 试剂后盖好管盖，颠倒混匀 8～10 次，将混合液 37 ℃ 水浴 16 h 左右（过夜）；

3、调 pH：将孵育好的混合液取出，在生物安全柜下用试剂盒自带的 1M NaOH 和 1% 柠檬酸将混合液 pH 调至 7.0；

4、高速离心去杂：将调 pH 后的上清 4 ℃，10,000 ×g，20 min 离心后收集上清；

5、过滤：将收集到的上清依次经 1 μm 滤膜和 0.45 μm 滤膜过滤；

注：如需获得 30～1,000 nm 植物囊泡，可只进行 1 μm 滤膜过滤，不进行 0.45 μm 滤膜过滤。

6、加提取试剂：取上步离心上清液加入 Solution B 试剂，添加剂量如下（其他剂量请等比例换算）：

7、二次混合孵育：加入 Solution B 后拧紧管盖，通过涡旋振荡器混匀 1 min，将混合液 4 ℃ 静置 4 h 左右；

8、沉淀植物囊泡：取孵育好的混合液，于 4 ℃，10,000 ×g，60 min 离心，弃上清，将含有沉淀的离心管再次于 4 ℃，10,000 ×g，2 min 离心后，吸尽上清；

注：沉淀中富含植物囊泡，需尽可能吸尽上清液。

9、植物囊泡重悬：取合适量的 1 × PBS 均匀吹打离心沉淀，待其溶解后，将重悬液转移至新的 1.5 mL EP 管中（建议每 20 mL 植物汁液用 400 μL 左右 1 × PBS 重悬）；

10、植物囊泡收获：将含有重悬液的 1.5 mL EP 管于 4 ℃，12,000 ×g 离心 2 min，保留上清液，其中富含植物囊泡颗粒；

注：若沉淀较多，可 12,000 ×g，2 min 离心多次至无明显沉淀，每次取上清。

五

纯化和保存植物囊泡

1、纯化植物囊泡：将收获的植物囊泡颗粒粗品转入 Exosome Purification Filter（EPF 柱）上室中，于 4 ℃，3,000 ×g 离心 10 min，离心后收集 EPF 柱管底的液体，此液体即为纯化后的植物囊泡颗粒；

注：a. EPF 柱不可重复使用；b. 如需获得大颗粒植物囊泡，可不进行该步骤。

2、植物囊泡保存：将纯化后的植物囊泡以合适体积进行分装冻存于 -80 ℃ 低温冰箱中，以备后续实验使用。

注意事项

1、2 T 试剂盒内的 Solution A 溶液，收到后尽快放-80 ℃保存，使用前 4 ℃ 解冻，解冻后尽快用完，禁止反复冻融。

2、20 T 试剂盒内的 Solution A 溶液，收到后可以按照单次使用量分装，保存在 -80 ℃，使用前取出解冻。

3、Solution A 试剂静置有棕黄色沉淀，属于正常现象，使用前需混匀。

4、若对内毒素有严格要求，榨汁步骤请严格在生物安全柜下进行，关键用品和仪器注意消毒后使用。

5、纯化后的植物囊泡可保存在 -80 ℃ 冰箱中，避免反复冻融导致植物囊泡破裂。

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内容策划：王丹琦

内容审核：吴军

题图来源：图虫创意

参考文献

[1] Wang J , Zhang T , Gu R ,et al.Development and Evaluation of Reconstructed Nanovesicles from Turmeric for Multifaceted Obesity Intervention[J].ACS Nano, 2024, 18(34):19.DOI:10.1021/acsnano.4c05309.

[2] Sundaram K, Mu J Y, Kumar A, et al. Garlic exosome-like nanoparticles reverse high-fat diet induced obesity via the gut/brain axis [J]. Theranostics, 2022, 12(3): 1220-1246.

[3] Yan L , Cao Y , Hou L ,et al.Ginger exosome-like nanoparticle-derived miRNA therapeutics: A strategic inhibitor of intestinal inflammation[J].Journal of Advanced Research, 2025, 69(000):1-15.DOI:10.1016/j.jare.2024.04.001.

[4] Zheng Y , Wang T , Zhang J ,et al.Plant-Derived Nanovesicles: A Promising Frontier in Tissue Repair and Antiaging[J].[2025-08-21].

来源：健康贴心宝