摘要：读完本文，你不仅能看懂每一道光路，还能看穿它们背后的“套路”。

你是否曾有这样的疑问：

“这台显微镜我对了焦，但图就是不清楚，是我近视了吗？”

“为什么荧光怎么调都没亮，光到底去哪儿了？”

“光路调了一圈，感觉比光本身还曲折……”

别急，这次我们就带你 一次讲清楚显微镜里光是怎么走的！

读完本文，你不仅能看懂每一道光路，还能看穿它们背后的“套路”。

显微镜的本质：一场关于光的旅程

显微镜，归根结底就是一个引导光线走特定路径、让你看到样本细节的装置。不同类型显微镜（正置 / 倒置）、不同观测方式（透射 / 反射 / 荧光 / DIC / 相差等），其“光走的路”也不一样。

我们今天就通过几个常见光路图，带你理清光的前世今生：

主流显微镜结构分类 & 光路概览

正置显微镜（Upright Microscopes）

适合组织切片、载玻片、常规材料分析

观察时从上方看样本，光从下方照上来

1. 透射光光路（Brightfield / Phase contrast / DIC）

光源在下方（灯泡+集光器）

光穿过样本 → 被物镜采集 → 经反射镜 / 棱镜折返 → 目镜或相机

适合透明样本（细胞、组织切片）

2. 荧光落射光路（Epifluorescence）

激发光从上方（通过物镜）照向样本

发射光反方向返回，经过滤光片组 → 成像

倒置显微镜（Inverted Microscopes）

适合培养皿、液体样本、活细胞观察

样本在上，物镜在下，看起来像“仰望细胞世界”

光从上方发出 → 穿过样本 → 被下方物镜采集 → 成像

灯源位于样本上方，物镜位于底部，观察方向朝上

2. 落射荧光路径（Epifluorescence）

与正置类似，激发光走“物镜通道”，样本发射光再走回来

与透射路径共用物镜，但光源从侧面或后部耦合

激光扫描共聚焦显微镜（Confocal）

荧光专用 + 高分辨 + 层切成像

核心特色：

激光点扫描 → 高 NA 物镜 → 发射光回收

pinhole 小孔过滤 → 只保留焦点图像 → 实现“光学切片”

光路到底怎么“配”？

你可能会问：

“我用明场 + 荧光，是不是就得两个光源？物镜还得兼容？” 答案是：是的，但显微镜通常都配好了。

现代显微镜厂商早已为你预设好“光路互不干扰”的组合系统：

共用物镜：落射荧光 + 明场都能用同一物镜

多光源切换：灯泡、LED、激光，一机多控

软件同步：自动识别通道，快速切换激发/发射设置

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来源：凯视迈精密测量