摘要：随着抗体药物在生物制药领域的广泛应用，抗体的优化和改造成为了提高治疗效果的关键。兔单克隆抗体（兔单抗）由于其较高的亲和力和优越的抗原识别能力，已成为抗体研发中的重要工具。然而，兔源抗体在临床应用中的免疫原性问题限制了其广泛使用。因此，兔单抗的人源化改造成为当前

随着抗体药物在生物制药领域的广泛应用，抗体的优化和改造成为了提高治疗效果的关键。兔单克隆抗体（兔单抗）由于其较高的亲和力和优越的抗原识别能力，已成为抗体研发中的重要工具。然而，兔源抗体在临床应用中的免疫原性问题限制了其广泛使用。因此，兔单抗的人源化改造成为当前抗体开发的重要步骤，通过优化抗体的免疫原性、提升亲和力和特异性，进一步推动其在药物开发中的应用。

1. 兔单抗制备的基本概念与优势

兔单抗的制备通常通过免疫兔获得靶抗原的单克隆抗体。在兔体内，由于免疫反应的差异性，兔单抗往往能够识别并结合一些小鼠或人类抗体难以识别的抗原表位，因此具有较高的亲和力和特异性。兔源抗体在肿瘤免疫治疗、病毒感染以及自身免疫性疾病治疗中有着广泛的应用前景。

然而，兔单抗作为外源性抗体，其免疫原性较强，可能引发免疫排斥反应。为了将兔单抗用于临床，必须通过人源化改造技术将其转换为与人类免疫系统兼容的形式，从而避免或降低免疫反应的发生。

2. 兔单抗人源化改造的技术方法

兔单抗人源化改造的核心目标是通过将兔源抗体的特定区域替换为人类免疫系统的序列，减少免疫原性，同时保留抗体的特异性和亲和力。以下是几种常见的兔单抗人源化改造策略：

2.1 CDR重建与优化

抗体的互补决定区（CDRs）是决定抗体与抗原结合亲和力的关键区域。在兔单抗人源化改造中，通常通过将兔单抗的CDR区域替换为人类抗体的CDR序列来降低免疫原性，同时保持原抗体的抗原识别能力。为了优化亲和力，可以进一步通过定向突变、亲和力成熟技术或高通量筛选技术改造CDRs，从而提高抗体与靶标的结合力。

通过基因工程技术，科学家可以在不改变抗体识别能力的情况下，优化CDRs的氨基酸序列，使其更加与人类抗体的结构兼容，同时提高抗体的稳定性和亲和力。

2.2 框架区人源化

抗体的框架区（FRs）决定了抗体的结构稳定性。兔单抗的框架区通常与人类框架区有所不同，这会影响抗体在体内的稳定性和表达量。在进行兔单抗人源化时，通过将兔源抗体的框架区替换为与人类抗体框架区相似的序列，可以提高抗体的稳定性、可表达性以及生产效率。

对于全人源化的抗体制备来说，框架区的改造尤为关键。优化框架区有助于减少免疫反应的发生，并确保抗体能够在临床应用中有效发挥作用。

2.3 亲和力成熟与优化

在兔单抗人源化过程中，亲和力的提升是一个重要目标。亲和力成熟技术能够通过突变优化抗体的结合力，从而使其与靶标抗原结合更为紧密。在这一过程中，可以采用多种方法，如定向突变、随机突变、噬菌体展示技术、酵母展示技术等，通过筛选获得高亲和力的抗体变体。

随着亲和力成熟技术的进步，科学家能够对兔单抗进行精准优化，提升其特异性和亲和力，从而提高抗体药物的疗效。

2.4 全人源化改造

全人源化抗体是指将抗体的所有序列完全替换为人类来源的序列，以减少免疫原性并提高抗体在人体内的兼容性。对于兔单抗来说，全人源化的改造过程中不仅需要对CDRs进行重建，还需对框架区进行全面替换，以确保抗体与人体免疫系统的兼容性。

全人源化抗体在临床应用中具有显著优势，它能够有效避免免疫排斥反应，提高治疗效果。全人源化兔单抗的开发通常需要多轮筛选和优化，确保抗体能够在免疫原性和亲和力之间找到最佳平衡。

3. 兔单抗人源化改造中的挑战

尽管兔单抗人源化改造技术已取得一定进展，但在实际操作中仍面临一些挑战：

- 免疫原性问题：尽管通过框架区优化和CDR重建可以减少免疫原性，但全人源化抗体仍然可能在某些情况下引发免疫反应。如何进一步减少免疫原性，提升抗体的临床适应性，仍然是一个亟待解决的问题。

- 亲和力与特异性平衡：在改造过程中，如何平衡亲和力与特异性是一个重要的难题。过度优化亲和力可能会导致抗体对非靶标抗原的识别增强，从而影响其特异性。

- 生产问题：兔单抗的生产过程中可能面临表达量不足或表达不稳定的问题。人源化改造后，如何提高抗体的表达效率，并确保其在生产过程中的稳定性，是抗体制备的关键挑战。

兔单抗人源化改造技术在抗体药物研发中具有重要意义。通过优化CDRs、框架区和亲和力成熟等策略，可以有效提升抗体的亲和力和特异性，推动抗体药物的临床应用。尽管面临免疫原性、亲和力平衡和生产效率等挑战，但随着技术的不断发展，兔单抗人源化改造将在未来的药物开发中发挥越来越重要的作用。

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来源：泰克生物