摘要：流行性感冒（简称流感）是由流感病毒引起的一种急性呼吸道传染病，甲型和乙型流感病毒每年呈季节性流行[1]。流感病毒抗原性易变，传播迅速，容易在学校、托幼机构和养老院等人群聚集的场所暴发疫情，孕妇、婴幼儿、老年人和慢性病患者等高危人群感染流感后往往病情更重[2]。
流行性感冒（简称流感）是由流感病毒引起的一种急性呼吸道传染病，甲型和乙型流感病毒每年呈季节性流行[1]。流感病毒抗原性易变，传播迅速，容易在学校、托幼机构和养老院等人群聚集的场所暴发疫情，孕妇、婴幼儿、老年人和慢性病患者等高危人群感染流感后往往病情更重[2]。
相关研究发现 2010~2015 年，全国平均每年有 8.8 万（95% CI：8.4 万~9.2 万）例流感相关呼吸系统疾病超额死亡，2006~2019 年间，每年流感导致的超额门急诊就诊例数平均为 300.5 万（95% CI：216.5 万~391.2 万）[2]。
流感的诊断性检查主要包括病毒分离培养、血清学检测、免疫学检测和分子生物学检测，也有研究表明血常规对流感的诊断有所帮助，下文将一一梳理相关知识点。
01 流感主要实验室诊断
❶ 病毒分离培养
传统的病毒分离培养法是流感实验室诊断的「金标准」，检测人员在胚胎鸡蛋或哺乳动物细胞中培养病毒，然后通过更具特异性的检测手段来检验血凝素（HA）测定阳性样品中的流感病毒，如 RT-PCR[3]。
这种方法灵敏性高，并可进一步分析病毒亚型，但费时费力，无法在短时间内评估大量样本。一般需要 2~14 天，平均 3~5 天[4]。
最新的成人流行性感冒抗病毒治疗专家共识[1]中也指出，在流感流行季，对重症或有重症流感高危因素的「流感样病例」应进行病原学检测，但应尽早给予抗流感病毒药物治疗，不必等病原学结果。
图 1. 流感诊断和病情评估流程
❷ 血清学检测
若血清学检测提示恢复期抗体滴度比急性期上升 4 倍或以上，即可诊断为流感。急性期血清需在发病 3 天内采集，恢复期血清则在 2~4 周采集。
这项检查周期长，结果滞后，因此常用作回顾性研究及流感流行趋势监测[5]。
❸ 免疫学检测
1）免疫荧光法
主要包括直接免疫荧光试验（DFA）和间接免疫荧光试验（IFA），有研究认为在分子检测法出现之前，DFA 是继病毒培养之外最好的流感病毒检测方法之一，具有灵敏度高，操作相对便捷的优点[6]。
2）免疫胶体金检测法
主要包括胶体金快速免疫层析法（GICA）和快速斑点免疫金渗滤法（DIGFA），10~30 分钟可得出结果，适合在门诊和重症监护病房，有助于医生对病人及时开展诊治措施[7]。
❹ 分子生物学检测技术[4]
1）逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）
RT-PCR 对于 RNA 病毒来说是最普遍使用的分子扩增法，有助于对病毒亚型进一步分析，但价格昂贵，对检测人员有较高要求。
2）多重 RT-PCR 法
可在一个反应中同时检测多个呼吸道病毒和病毒分型，灵敏度高。
3）实时荧光定量 PCR 法
与传统 PCR 法相比，灵敏度和特异度大大提高。
4）反转录环介导等温扩增技术（RT-LAMP）
检测反应需在 65 ℃ 恒温下 1~2 h，灵敏度和特异度与 RT-PCR 相当。
5）依赖核酸序列的扩增法（NASBA）
可在不同来源序列中检测核酸的特定区域，较适用于扩增 RNA，灵敏度高。
6）焦磷酸测序法
实现了基因水平上进行病毒鉴定、亚型判断以及致病性分析，可以在 6 h 内完成一个样本的检测。
7）基因芯片技术
流感病毒检测灵敏度 86％，特异度 ≥ 99%。
8）质谱技术
是一种物理检测方法，4 h 内科检测出 92 种不同的流感病毒毒株，但质谱仪价格昂贵，不适合推广使用。
02 血常规
❶ 淋巴细胞（LYM）计数降低[7]
在 1~6 岁儿童中，感染 A 型和 B 型流感相比流感检测阴性的儿童 LYM 计数明显降低，且 A 型和 B 型流感间没有明显差异。
在 > 6 岁的儿童中，感染甲型流感的儿童 LYM 计数显著降低，而乙流感染者和流感病毒检测阴性者之间的 LYM 计数没有明显差异。
❷ 单核细胞（MON）计数升高
Coskun O 等认为，MON 计数增高可作为大流行时的替代标记物，用来诊断甲型流感（H1N1）[8]。
但也有研究发现，感染甲型或乙型流感病毒的 1 岁以上儿童与未感染流感病毒的儿童之间的 MON 计数无统计学显著差异[7]。
❸ 淋巴细胞 / 单核细胞比值（LMR）
LMR
对于儿童，LMR 的诊断价值在 > 6 岁儿童中比
❹ 血小板（PLT）计数降低
在 1~6 岁儿童中，甲型流感阳性的 PLT 计数明显低于流感阴性者，但乙型流感感染者的 PLT 技术没有明显改变。在 > 6 岁的儿童中，感染流感者与对照组间的 PLT 计数差异无统计学意义。因此，PLT 计数仅对 1~6 岁感染甲型流感的儿童具有预测价值[7]。
❺ 中性粒细胞 / 淋巴细胞比值（NLR）
Zhang 等的研究发现，NLR 是禽流感（AIV-H7N9）患者死亡的独立危险因素，相对于 NLR
不过在一项针对儿童的研究中，发现流感感染者和流感病毒检测阴性对照组之间的 NLR 无显著性差异[7]。
首发：丁香园检验时间
来源：重症医学
