摘要:试剂盒专为单克隆抗体制备全流程设计,可精准鉴定小鼠 IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG3、IgG2c 等 8 种亚型,解决传统试剂盒漏检稀有亚型的问题。在杂交瘤细胞筛选阶段,可快速淘汰非目标亚型细胞株,缩短克隆化时间 30% 以上;在抗体功能验证阶段,通
试剂盒专为单克隆抗体制备全流程设计,可精准鉴定小鼠 IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG3、IgG2c 等 8 种亚型,解决传统试剂盒漏检稀有亚型的问题。在杂交瘤细胞筛选阶段,可快速淘汰非目标亚型细胞株,缩短克隆化时间 30% 以上;在抗体功能验证阶段,通过亚型匹配下游实验(如 IgG1 适合 ADCC 效应研究),避免实验设计偏差;在人源化改造前,明确亚型效应功能(如 IgG2c 的 FcγR 结合能力),指导人源化亚型选择。
二、技术原理与科研级优化流程
基于双抗夹心 ELISA 技术,捕获抗体针对各亚型 Fc 段独特表位(如 IgG2a 的 CH2 结构域),检测抗体标记 HRP,配套亚型特异性阻断肽消除非特异性干扰。优化后的实验流程仅需 2.5 小时:样本预处理时,使用含蛋白酶抑制剂的处理液直接稀释 10 倍上样,无需离心过滤;96 孔板预包被 8 种亚型捕获抗体,单样本仅需 1 孔,配套 Excel 模板自动生成亚型报告,较传统方案节省 87.5% 耗材成本。
三、单克隆抗体制备全流程应用细节
1. 杂交瘤细胞初筛阶段
融合后 7-10 天的细胞培养上清(抗体浓度 10-50 ng/mL)可直接检测,优先筛选目标亚型细胞株。例如,若需激活补体功能,重点保留 IgG2a 亚型;若需 ADCC 效应,优先选择 IgG1 亚型。
2. 克隆化培养阶段
对有限稀释后的单克隆细胞株培养上清进行亚型鉴定,筛选纯一亚型细胞株(如 100% IgG2b),避免亚型混杂导致的实验数据波动。某团队曾通过该试剂盒筛选出 IgG3 亚型抗体,其 FcγRIIIa 结合力比 IgG1 高 2 倍,证实对肿瘤细胞杀伤效率更强。
3. 抗体生产与纯化阶段
腹水样本 1:1000 稀释后检测,避免高浓度抗体钩状效应;根据亚型选择纯化方式(如 IgG1 用蛋白 A、IgG2b 用蛋白 G),提升纯化效率 15%-20%。
四、科研数据支撑与典型案例
1. 亚型鉴定准确性验证
对 20 株已知亚型的小鼠单抗(涵盖 8 种亚型)检测,与流式细胞术一致性达 98.7%,其中对 IgG2c 亚型的检测限为 10 ng/mL,较传统进口试剂盒(检测限 50 ng/mL)漏检率降低 35%。
2. 肿瘤治疗抗体研发案例
某团队制备针对 PD-L1 的小鼠单抗时,通过该试剂盒筛选出 12 株 IgG1 亚型抗体,经 FcγRIIIa 结合力验证后,选择亲和力最高的克隆(KD=2.3 nM)进行人源化改造,最终人源化抗体 ADCC 活性比鼠源提升 40%,相关成果发表于《Journal of Immunology》。
七、实验注意事项与技术支持
细胞培养上清需在 48 小时内检测,或 - 80℃冻存避免降解;IgG3 亚型检测建议使用低离子强度缓冲液。技术支持包括每周在线培训、定制重组抗体标准品(如稀有 IgG2c),可联系 tech@youpin-bio.com 获取操作视频或试用装。编辑分享小鼠单克隆抗体IgG八种亚型鉴定试剂盒的价格是多少?小鼠单克隆抗体IgG八种亚型鉴定试剂盒的注意事项有哪些?单克隆抗体制备专用:小鼠IgG1-IgG2c八种亚型鉴定试剂盒的保质期是多久?
来源:喜欢吃哈密瓜