摘要：上海中医药大学附属龙华医院团队在《Phytomedicine》期刊发表最新研究成果，他们研究了增免抑瘤方（ZMYL）对卵巢癌类器官的影响，重点关注其对类器官表型和潜在机制的作用，并探索其作为免疫治疗药物的潜力。

上海中医药大学附属龙华医院团队在《Phytomedicine》期刊发表最新研究成果，他们研究了增免抑瘤方（ZMYL）对卵巢癌类器官的影响，重点关注其对类器官表型和潜在机制的作用，并探索其作为免疫治疗药物的潜力。

文章介绍

题目：增免抑瘤方抑制免疫富集型卵巢癌患者源性类器官的细胞周期

杂志：Phytomedicine

影响因子：6.7

发表时间：2025年4月

#1

研究背景

Background

卵巢癌是一种高度异质性的恶性肿瘤，尽管初期治疗反应良好，但耐药性导致复发。近年来，免疫治疗在多种癌症中取得了显著进展。

增免抑瘤方（ZMYL）是已故上海市名中医、妇科肿瘤名家庞泮池教授的经验方（专利号201110058966.7），由保真汤加减化裁而来，以益气养阴、清热解毒辅助治疗卵巢癌，临床疗效明显。然而，其具体的分子机制尚未完全明确，尤其是在免疫治疗的背景下。

该研究利用卵巢癌类器官模型，结合网络药理学和RNA测序技术，系统地研究了ZMYL对卵巢癌细胞周期和免疫反应的影响，揭示了其潜在的免疫调节机制。

#2

研究思路

Methods

该研究从卵巢癌手术组织中建立类器官模型，模拟肿瘤微环境。通过网络药理学预测ZMYL的治疗靶点，结合分子对接验证其成分与靶点的相互作用。

随后将卵巢癌类器官暴露于不同浓度的ZMYL，观察其形态学和基因表达变化，重点分析对细胞周期和免疫反应通路的调控。最后通过功能实验验证ZMYL对卵巢癌类器官的免疫调节作用，为其作为免疫治疗药物提供依据。

#3

研究结果

Results

1. 卵巢癌类器官的建立和形态学追踪

该研究通过不使用酶解离和Matrigel的方法，成功建立了卵巢癌类器官，以保留肿瘤组织的原生微环境并避免克隆选择。通过机械剪切的组织碎片培养类器官，并使用明场成像追踪其生长和形态变化，记录了类器官的密度、球形度和大小的时间变化。

在第14天，类器官表现出多种表型，反映了卵巢癌的异质性，并将这些表型分为6个类别进行分析。不同传代的生长动力学显示了类器官的适应性和生长潜力，强调了传代在类器官培养中的重要性。

研究为进一步探讨类器官的内部结构和细胞组成提供了基础，预计有助于揭示其生物学特性及作为卵巢癌研究模型的价值（图1）。

图1 卵巢癌类器官的建立。

2. 卵巢癌类器官的全面表征及细胞异质性

卵巢癌类器官通过组织学和细胞学分析进行了验证，保留了原生肿瘤的特征。苏木精-伊红染色显示类器官保持了良好的组织结构，PAX8染色证实了其上皮来源，Ki67染色证明了类器官的增殖活性。

单细胞RNA测序分析揭示了类器官与原始肿瘤在细胞分布上的高度重叠，反映了肿瘤的异质性。聚类分析将细胞分为13个组别，包括多种免疫细胞，表明类器官系统适合用于免疫疗法和药物反应研究。

T细胞的详细分析揭示了与其不同状态（激活、耗竭、细胞毒性）相关的基因表达模式，为中药治疗对肿瘤免疫微环境影响的研究提供了重要数据。这些结果展示了卵巢癌类器官模型在免疫治疗研究中的潜力（图2-3）。

图2 卵巢癌类器官的表征。

图3 卵巢癌组织和类器官的单细胞RNA测序。

3. 基于网络药理学的ZMYL在卵巢癌中的治疗靶点和通路鉴定

该研究通过网络药理学方法分析了ZMYL在卵巢癌中的治疗机制。通过多数据库筛选，确定了ZMYL方剂的核心靶点，并与卵巢癌相关差异表达基因（DEG）进行重叠，最终确定了34个潜在核心靶点。

构建的疾病-药物-化合物-靶点网络揭示了来自8种草药的18种生物活性化合物可能与这些靶点相互作用。分子对接分析进一步确认了活性成分（如薯蓣皂苷、黄芩苷、槲皮素）与关键靶点（如TP53、VEGFA等）的相互作用。研究为ZMYL方剂在卵巢癌的多靶点治疗提供了理论支持（图4-5）。

图4 ZMYL配方成分的UPLC-QTOF-MS分析。

图5 ZMYL的疾病-药物-化合物-靶点网络构建。

4. ZMYL对卵巢癌类器官的剂量依赖性效应

该研究通过卵巢癌类器官培养系统验证了ZMYL的剂量依赖性效应。随着ZMYL浓度的增加，类器官的尺寸缩小、形状变化明显，细胞密度降低，结构变得稀疏。

Ki67免疫组化染色显示，ZMYL的浓度升高显著减少了Ki67阳性细胞，表明细胞增殖受抑制。这些结果表明，ZMYL能够影响卵巢癌类器官的生长和细胞结构，证实了其潜在的治疗效果（图6）。

图6 ZMYL对卵巢癌类器官的剂量依赖性影响。

5. ZMYL对卵巢癌类器官细胞通路的调节

该研究通过时间序列成像和转录组分析，评估了不同浓度ZMYL对OV087和OV088类器官的影响。结果显示，ZMYL显著改变了类器官的生长、结构和基因表达模式。

主成分分析揭示了类器官对治疗的不同反应，而层次聚类分析进一步区分了处理组和对照组。热图与单细胞测序分析发现，T细胞相关基因和34个靶基因的表达发生变化，其中6个基因（TP53、JUN、VEGFA、ERBB2、MMP2、CAV1）的相互作用提示它们可能在方剂效应中发挥关键作用（图7）。

图7 ZMYL对卵巢癌类器官基因表达的调节。

ZMYL处理后，OV087和OV088卵巢癌类器官中分别有5554个和4177个基因下调，1023个和651个基因上调。维恩图分析显示，两种类器官中共有853个下调基因和68个上调基因。

基因本体（GO）分析表明，ZMYL抑制了细胞周期通路（如CCNB2、CDC20、CDC25A、CDK10下调），同时激活了免疫反应通路（如CXCL10上调）。热图进一步证实了这些基因表达变化，表明ZMYL在抑制癌细胞增殖的同时增强了免疫反应（图8）。

图8 ZMYL对卵巢癌类器官免疫反应和细胞周期通路的影响。

小结

该研究表明增免抑瘤方能够同时靶向卵巢癌类器官中的致癌驱动因子和免疫检查点。与传统的单药治疗不同，增免抑瘤方的多组分机制为整合中药与现代免疫治疗提供了协同框架。

这些发现为未来将增免抑瘤方作为精准医学策略以增强卵巢癌治疗效果和减轻化疗耐药性奠定了基础。

参考文献

Cao Q, Cai C, Wang C, Li L, Liu J, Zhang J, Rong M, Ren J, Han Y, Zhang J, Han X. Zengmian Yiliu formula suppresses cell cycle in immune-rich ovarian cancer patient-derived organoids. Phytomedicine. 2025 Jun;141:156721. doi: 10.1016/j.phymed.2025.156721.

来源：培养盒守护者