摘要：血脑屏障（Blood-BrainBarrier, BBB）作为中枢神经系统的重要防御屏障，限制了大部分大分子药物进入脑组织。多肽因其特异性强、靶向性好，在脑部疾病治疗中展现出潜在优势。为了研究多肽的渗透性，Transwell BBB模型已成为一种广泛应用的体外

血脑屏障（Blood-BrainBarrier, BBB）作为中枢神经系统的重要防御屏障，限制了大部分大分子药物进入脑组织。多肽因其特异性强、靶向性好，在脑部疾病治疗中展现出潜在优势。为了研究多肽的渗透性，Transwell BBB模型已成为一种广泛应用的体外评价平台。

TranswellBBB模型的构建：Transwell模型利用具有高紧密连接（如ZO-1、Claudin-5等）的内皮细胞（如hCMEC/D3细胞）培养于Transwell小室的上层，模拟BBB内皮屏障。培养过程中，通过检测横向电阻（TEER）值以监测模型完整性，TEER值一般表明模型具有良好的屏障功能。

多肽渗透性评价方法：在渗透实验中，将待测多肽样品加入Transwell模型的上腔，经过特定时间孵育后，收集下腔培养液并测量其中多肽的浓度，以计算多肽的表观渗透系数或渗透比率。荧光标记（如FITC、Cy5.5）或放射性标记方法可用于多肽的可视化追踪和定量分析。

影响多肽渗透性的因素：多肽的理化性质（如分子量、亲水/疏水性、电荷等）直接影响其渗透能力。小分子量、疏水性较强的多肽通常具有更优的渗透性能。此外，模型条件（如培养时间、TEER值、培养基成分）以及多肽的转运机制（如受体介导转运、被动扩散或内吞作用）均可能影响实验结果。

研究意义与展望：利用Transwell BBB模型对多肽渗透性的评价有助于筛选具有潜在脑靶向能力的候选药物，为脑部疾病治疗提供重要依据。未来研究可进一步优化模型参数，并结合更先进的成像和检测技术，以提高实验的灵敏度和准确性。

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体外BBB模型中的通透性（转胞吞作用）检测平台：

我们用hCMEC/D3， bEnd.3 和U251构建了一系列的体外血脑屏障模型用于检测抗体透过血脑屏障的通透性。

Transwell-BBB模型列表

Ø hCMEC/D3和bEnd.3单细胞模型

Ø hCMEC/D3和U251细胞的共培养模型

Ø bEnd.3和U251细胞的共培养模型

来源：科学融入世界