作者:彭湖1,2,陈金华1,2,3*1摘要:单位:1.西华师范大学环境科学与工程学院;2.四川农业大学西南作物基因资源发掘与利用国家重点实验室;3.四川农业大学小麦研究所
单位:1.西华师范大学环境科学与工程学院;2.四川农业大学西南作物基因资源发掘与利用国家重点实验室;3.四川农业大学小麦研究所
简介:彭湖,男,四川遂宁人,硕士研究生,研究方向:病原微生物学。*通信作者,讲师,博士,从事病原微生物学研究。
基金项目:国家自然科学基金项目(32100163);校科研基金项目(11A022);博士启动基金项目(20E043)。
来源:《安徽农业科学》2024年21期
引文格式:彭湖,陈金华,尉赟.蝉虫生真菌的分离纯化及鉴定[J].安徽农业科学,2024,52(21):78-81.
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蝉(Cicadidae)是昆虫纲,半翅目,蝉科(Hemiptera: Cicadidae)的昆虫。其活动范围广泛,全球均有分布,全世界有180个属,2000余个种类。在我国,蝉科昆虫从南到北均有分布,其危害宿主种类很多,包括苹果树、梨树、樱桃、杏、枣、柑橘等多种果树,杨树、柳树、榆树、茶树等观赏树木或经济作物。蝉是吸汁性害虫,主要以幼虫虫态危害植物根部及幼嫩部分,成虫虫态在树枝产卵繁殖,严重影响林木的生长,危害其产物的数量和品质。对蝉科害虫的防治方法很多,主要有两类:第一类是化学药剂的使用,如吡虫啉、苦参碱、扑虱灵、氟氯氰菊酯乳油、阿维菌素乳等;第二类是生物防治,生物防治不仅包括天敌防治,比如使用寄生蜂、蜘蛛、螳螂等,还包括微生物防治,比如使用大孢巴科霉(Batkoa major)和球孢白僵菌(Beauveria bassiana)。化学防治方法,虽然效率较高,但容易对环境造成污染,影响非靶标的生物,包括其他昆虫和人类健康,也可能影响天敌种群而导致害虫二次暴发。因此使用生物学的方法来防治害虫,专一性强,不易产生抗药性,对人类和生态环境绿色无毒。虫生真菌寄生在特定昆虫的幼虫或成虫体内,通常对人类、非靶标生物安全无害,而且能够在害虫中,自然条件下广泛流行,因此在农业和林业害虫生物防治过程中发挥着重要作用。
目的
了解蝉的寄生真菌种类,为进一步利用虫生真菌绿色防治蝉等害虫提供菌种资源。
方法
136。再对这些菌株进行形态学观察,并通过核糖体DNA序列的测序与分析,进一步对其进行鉴定和研究。结果
◆虫生真菌形态观察
136在PDA培养基上丝状菌丝呈放射性生长,菌丝最初为白色,短而致密,生长缓慢,有分支和分隔,待菌落开始产孢后,逐渐变为黄棕色,孢子为黄棕色,菌落背面和正面颜色相同,都是黄棕色。具有3级分生孢子梗,孢子圆形,如图1所示。1真菌菌株Y相似,在 PDA 培养基上菌丝放射性生长,最初为白色,短而致密,生长缓慢,菌丝有分支分隔,孢子为黄棕色,菌落背面也为黄棕色。具有3级分生孢子梗,孢子圆形,如图2所示。3在PDA培养基上菌丝为白色,短而致密,生长缓慢,菌丝有分支分隔,孢子为白色,菌落正面背面都是白色。分生孢子发育时,分生孢子梗末端膨大,孢子圆形或椭圆形,如图3所示。图3 虫生真菌Y的菌落、菌丝和孢子136的基因组DNA进行PCR扩增,均获得了大小约600bp的单带,将PCR产物送至生工生物工程(上海)股份有限公司测序。虫生真菌Y1的ITS序列为609bp,测序结果表明,与帚霉属真菌(Scopulariopsis alboflavescens)的相似度为98.29%,系统进化树将真菌菌株Y1与S.alboflavescens(ACCESSION NR_15620)聚类到一支(图4),初步鉴定虫生真菌Y1为S.alboflavescens属真菌。1虫生真菌菌株Y3的ITS序列为612bp,在NCBI数据库中与帚霉属真菌Scopulariopsis alboflavescens相似度为98.45%,系统进化树将真菌菌株Y3与S.alboflavescens(ACCESSION NR_15620)聚类到一起(图5),初步鉴定菌株Y3虫生真菌菌株Y6的ITS序列为642bp,与福斯卡帚霉Scopulariopsis fusca相似度98.66%,与Scopulariopsis caseicola的相似性为98.75%,系统进化树将菌株Y6与S.caseicola(ACCESSION NR_155811)、福斯卡帚霉S.fusca(ACCESSION NR_145258)聚类到一起(图6),初步认定其是一种S.caseicola属的真菌。图6 虫生真菌菌株Y及相关菌株ITS 序列的系统发育树结论
13菌落颜色为黄棕色,菌丝白色,孢子黄棕色,圆形,大小均匀,经过ITS序列比对,结合形态特征,其为Scopulariopsis alboflavescen属真菌。Y6菌落颜色为白色,PDA培养基上菌丝短而致密,生长缓慢,显微镜下观察其菌丝为无色,孢子圆形或椭圆形,大小均匀,经过ITS序列比对,结合形态学特征,确定为Scopulariopsis属真菌。更多推荐论文
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采编:小白
排版:小同
来源:安徽农业科学