【东东法规百科】细胞治疗产品生产检查指南对细胞库的检查要点

摘要：细胞治疗产品生产检查指南于2025年1月份正式发布实施，检查员可参照本指南的要求，对企业的生产质量管理进行检查，结合现场实际情况基于风险综合评价其生产质量管理情况。

转自：东富龙

引言

细胞治疗产品生产检查指南于2025年1月份正式发布实施，检查员可参照本指南的要求，对企业的生产质量管理进行检查，结合现场实际情况基于风险综合评价其生产质量管理情况。

本指南涉及细胞治疗产品的生产现场检查，包括从供者材料的运输、接收、产品生产和检验到成品放行、贮存和运输的全过程，也包括直接用于细胞产品生产的基因修饰载体或其他赋予细胞特定功能的材料的生产、检验和放行等过程。

质量管理

数据可靠性管理

细胞治疗产品上市许可持有人应在《药品生产质量管理规范》（GMP）及《药品记录与数据管理要求（试行）》要求基础上，建立数据可靠性管控程序，确保自供者材料运输到产品运输过程中的运输、生产、检验、贮存等环节产生的数据应满足归属至人、清晰可溯、同步记录、原始一致、真实准确的基本要求。检查时应重点关注：

（1）员工应定期接受数据可靠性培训；

（2）批生产、检验、追溯系统、辅助记录的可靠性、准确性、可追溯性以及纸质记录与电子记录数据的一致性；

（3）文件和记录的发放、使用和销毁应受控，已经填写的记录的修改应有程序控制，同时，注意对患者及供者信息记录的保密；

（4）与数据可靠性的相关操作，如关键数据的第二人复核情况、数据备份管理、电子设备和计算机化系统的用户权限管理、打印条的管理、电子系统的时间和时区修改权限控制及用于记录时间的钟表管理；

（5）计算机化系统的验证情况和电子设备的校验的执行情况；

（6）企业应尽量采用具有审计追踪的仪器设备，对于没有审计追踪的仪器设备，要有明确的流程规定确保数据的可追溯性，有审计追踪的仪器设备要有文件规定如何进行权限管理以及审计追踪执行情况；

（7）由电子方式产生的原始数据应当显示数据的留存过程，包括所有原始电子数据的信息、相关的审计追踪、每一个分析过程（若数据进行再次数据分析），以及数据分析的设计参数等。

厂房与设施设备

厂房设施

仓储区应设置独立的供者材料接收区域，成品的贮存应配置足够数量的低温贮存区域，如液氮罐，并有适当的监控。

设备——程序降温仪和细胞复苏仪

程序降温仪应确认程序降温速率，低温下温度维持功能应满足生产需求，应具备过程温度数据的实时监测和记录功能，关注过程中异常操作，如意外打开腔体、降温速率异常等。

细胞复苏仪宜采用无水加热方式，如使用水加热方式应采取对水的隔离措施。

物料及产品

细胞治疗产品对温度条件敏感，产品储运过程中应关注温度波动对产品质量的影响，以及其他可能的干扰因素。宜配备产品追溯系统，以保证产品与患者的匹配性。

贮存

细胞治疗产品的有效成分是活的细胞，通常贮存在气相液氮罐。气相液氮罐通过底部的液氮蒸发保持罐体内的温度，通常在罐体的顶部（经过验证最差温度点）设置温度探头。液氮的补充形式可以是自动的，也可以是手动的。细胞产品通常置于不锈钢或铝制冻存盒中，检查主要关注以下内容：

（1）关注气相液氮罐开盖取用产品对罐内其他产品的影响，并有验证数据支持。

（2）企业应对气相液氮罐的液位监控、罐体报警和远程报警系统进行定期维护，并建立流程对报警信息进行处置。

（3）气相液氮罐温度探头设置可参考温度分布验证结果进行设置。

（4）成品贮存和其他产品譬如T细胞或供者材料是否分开或隔离贮存。

运输

冻存状态的细胞治疗产品的运输，通常采用液氮罐或干冰运输。运输方式应有验证数据支持，关注运输容器低温保持能力及时长。

运输使用的气相液氮罐，除液氮罐本身的验证外，还应当进行产品的运输确认，并根据验证结果在运输程序文件中确定型号、液氮充装装量和可维持时间等要求。液氮罐的验证通常应挑战最差的运输条件，如高温、运输振荡、最小液氮充装量等。使用干冰运输的，也需要检查其运输包装是否经过适当验证，并根据验证数据制定运输规程。

产品在厂区内的转运、产品放入运输容器、产品转移时进行的核对和产品在医院中取出核对等都会造成产品在室温中的暴露。检查时，应关注对产品冻存后暴露风险进行的评估，其验证数据应能覆盖其最大的可能暴露次数、暴露温度和暴露时间。

生产管理

细胞分离和分选

如需复苏供者材料，在运输至复苏操作过程中，应关注运输温度和时间记录；复苏应在规定时间和条件下完成；关注复苏前后不同批次细胞相关指标（如：细胞活率、活细胞密度等）数值变化；关注复苏后供者材料洗涤步骤工艺参数；

细胞库制备

细胞库的建立是一些细胞治疗产品（如：干细胞产品）生产工艺中的重要步骤，细胞库系统的建立、维护和检定应符合药品注册批准文件、《中华人民共和国药典》及GMP 生物制品附录等要求，在检查中应关注以下内容：

（1）细胞库的建立、检定、放行和使用按照注册批准的要求进行。细胞库的传代次数应符合注册批准证明文件，不应超过规定的代次。

（2）应关注不同来源供者材料建立细胞库的批间一致性，包括传代代次、生物学特性、遗传学特性、建库规模等，以及不同来源供者材料对产品质量的影响，并有相关研究数据支持。

细胞的复苏和活化

（1）如需复苏分离/分选后的细胞，或复苏工作细胞库中的细胞，关注点参考细胞分离和分选部分的相关要求。

（2）分离或分选后细胞及工作细胞库复苏后的细胞数量以及活率应在注册批准范围内，及其对后续生产规模和时间的影响。

（3）关注备份细胞管理的相关规定及处理措施记录，是否允许再次投产，是否符合注册要求。

（4）应关注活化过程的工艺参数（如细胞密度、活化试剂用量/比例、活化时间、换液要求等）的监测和控制措施，应确保参数在规定范围内并与批准工艺一致。

（5）应关注活化后相关评价指标（如活化效率等），并关注其批间一致性。

细胞产品冻存

（1）应关注程序降温仪相关参数设置符合注册批准要求。

（2）应关注降温曲线的批间一致性，如出现异常，应开展相关调

查、评估对细胞质量的影响及风险控制措施和适用性。

（3）关注冻存袋/管从降温设备转移至液氮罐的时限、温度和方式。

（4）应明确冻存条件和时间，并有稳定性研究数据支持。

包装和标签

应考虑包装容器和标签材质及包装过程中可能影响产品质量的相关因素，重点关注温度和时限对供者材料和细胞治疗产品质量的影响，并关注供者材料或细胞产品防混淆和差错的措施。

供者材料和细胞治疗产品通常贮存在低温条件下（如：气相液氮）以保持细胞活性，应关注包装容器及标签的黏附性、耐久性和易读性等特殊要求。主要关注以下方面：

（1）细胞治疗产品包装容器及标签应制定入厂验收、贮存及管理和控制程序。

（2）细胞治疗产品的包装容器应符合生物制品的包装容器要求，还应能够耐受长期深低温冷冻而保持其完整性和细胞治疗产品的无菌状态。在超低温贮存条件下包装容器的相容性验证和密封性验证应覆盖产品有效期。应采用经验证的方法对包装容器的密封性进行定期检查，并关注包装容器在贮藏和运输过程中受到物理冲击时不会产生碎裂。

（3）标签应选用合适的材质譬如耐液氮超低温度。标签的黏附性、温度耐受性、冻融性、溶剂耐受性（如消毒酒精、杀孢子剂、水、培养基等）应经过验证，标签粘合剂应符合低温、短固化时间以及不产生迁移的要求。供者材料的标签应包含提供可追溯性所需要的相关信息，应对标签编号、内容及版本控制等进行规定。产品标签还应关注在带霜条件下便于辨认的要求。

东富龙生物样本存储设备方案

东富龙深耕生物医药领域的装备和系统解决方案，紧密跟随药物不同阶段的发展，提供当前及未来药物研发生产制造过程所需要的关键仪器装备和系统解决方案。在CGT领域，致力于构建从采集-分离-制备-培养扩增-灌装-冻存-复苏全过程关键装备的整体解决方案。冻存作为整体解决方案的重要环节，对细胞活性有重要的影响，东富龙提供样本存储工艺流程涉及的程序降温、冷链运输、低温存储、样本复苏等步骤配套的关键工艺设备，配套样本库信息化管理系统，为用户提供智能化存储新模式。

程序降温仪（液氮式）

程序降温仪（液氮式）是一种高性能、安全可靠的温度变化速率可控的冷冻设备。程序降温系统采用了最新的温控技术和液氮分散技术，使程序降温过程均一稳定，可以广泛应用于轻工、农、医、基础生物研究等各个领域中。

图3. 程序降温仪（液氮式）示意图

程序降温仪（非液氮式）

程序降温仪（非液氮式）是一种高性能、安全可靠的温度变化速率可控的冷冻设备，该设备无需液氮即可实现冷冻作业，不仅提高了人员操作的安全性，而且降低了日常使用成本。

图4. 程序降温仪(非液氮式)示意图

分体式超低温/深低温自动化生物样本存储系统

分体式超低温/深低温自动化生物样本存储系统采用可自主移动式存储系统平台对多个冻存罐或者超低温冰箱进行细胞存储工作。可满足和适应市场领域有干细胞/免疫细胞的商业化存储、细胞治疗最终产品存储（Car-T和干细胞药物）、生物制品疫苗和抗体领域细胞库、人类精子库。

分体式超低温/深低温自动化生物样本存储系统主要为解决样本存取全过程中的温度暴露、关键步骤温度监控和记录、数据自动采集、样本信息完整性、存储位置等信息管理、权限管理、过程追溯等重要问题提供最佳解决方案。

样本库规模大小可定制，自主移动式存储系统平台对接多个存储罐，可自主移动，自主定位，自主存取样本，样本库可扩展性强，且根据场地灵活设计样本库方案，满足全流程自动化的前提下，样本库建设经济高效。

图6. 分体式深低温自动化生物样本库

细胞复苏仪

袋式细胞复苏仪专为低温保存的冻存袋内的细胞复苏仪而设计，兼容多种冻存袋类型（细胞冻存袋容积为25ml到1000ml），无需额外的人工操作，即可在保证细胞活率的基础上，使细胞快速从固态复苏至冰水混合物状态。

图7. 细胞复苏仪（袋式）

管式细胞复苏仪专为低温保存的冻存管内的细胞复苏而设计，无需额外的人工操作，即可在保证细胞活率的基础上，使细胞快速从固态复苏至冰水混合物状态。

图8. 细胞复苏仪（管式）

冻存管

东富龙冻存管能够有效提高设备中样本容量，建议使用高度较低的外旋管，推荐的存储耗材如下表所示。

表1.存储耗材

*耗材更多信息详见产品彩页或官方网站

COP西林瓶

COP 西林瓶结合塑料和玻璃包装的最佳特性，适用于液体药物。该西林瓶基于环烯烃聚合物（COP）的单层结构，拥有惰性接触表面，其化学物理特性使其适用于许多应用，包括生物制剂、疫苗、小分子制剂和放射性药物。它为具有毒性或高附加值药物的制造商提供了包装安全性。COP 西林瓶的关键性尺寸均符合 ISO 8362 的规定，其也可以按客户需求特殊定制。

图9. COP西林瓶

产品特点：

（1）新型环烯烃聚合物（COP）；

（2）极少的析出和溶出物，良好的生物相容性；

（3）低蛋白质吸附，良好的药物相容性；

（4）对或高或低的PH 值呈惰性反应（不分层）；

（5）无重金属释放；

（6）耐受极低的温度（-196℃）；

表2. 产品规格

冻存保护液

细胞保存液系列产品适用于多种不同细胞类型的长期冷冻储存，为预配的即用型冷冻保护剂，系列产品均采用无血清技术配方，其中组分均采用医药级原料。细胞保存液系列产品为不同细胞类型配备不同的产品选择，可广泛应用于外周血单个核细胞、造血干细胞、间充质干细胞、免疫细胞(T、NK、DC等）以及CHO、HEK293、293T、JurKat及K562等。

图10. 细胞冻存保护液

表3. 细胞冻存保护液