桑黄水煎液对 D-半乳糖衰老模型小鼠的抗氧化作用

B站影视 2025-01-08 09:29 2

摘要:桑黄作为药用真菌,在传统中医和现代药理研究中均展现出重要价值。传统上用于妇科疾病治疗,现代研究发现其具有抗氧化、抗肿瘤等多种功效。然而,其对衰老模型小鼠抗氧化能力的影响尚不明晰。鉴于核因子 E2 相关因子 2(Nrf2)/血红素氧合酶 1(HO - 1)通路在

出版日期:2019年

发表刊物:《中国现代应用药学》

论文作者:谷丽丽,蔡为明,金群力,张作法,王建功,张信岳

桑黄作为药用真菌,在传统中医和现代药理研究中均展现出重要价值。传统上用于妇科疾病治疗,现代研究发现其具有抗氧化、抗肿瘤等多种功效。然而,其对衰老模型小鼠抗氧化能力的影响尚不明晰。鉴于核因子 E2 相关因子 2(Nrf2)/血红素氧合酶 1(HO - 1)通路在抗氧化应激中的关键作用,该研究以“浙黄 1 号”桑黄为对象,探究其对正常及 D - 半乳糖诱导衰老小鼠的氧化指标和 Nrf2/HO - 1 通路的影响,明确抗氧化作用机制。

实验材料

动物

选用清洁级 ICR 小鼠,体重 18 - 22g,购自浙江省实验动物中心,饲养于屏障系统,环境温湿度适宜且光照规律,饲料来源可靠。

药物及试剂

“浙黄 1 号”桑黄由专业合作社提供并鉴定合格;同时准备了维生素 E、D - 半乳糖及多种检测试剂盒、抗体等,分别购自不同知名厂商,确保实验试剂的质量与可靠性。

仪器

涵盖电子天平、电热恒温水槽、离心机、酶标仪、Western blot 转膜仪等先进设备,满足实验中药物制备、样本检测及蛋白分析等操作需求。

实验方法

桑黄水煎液制备

将桑黄粉碎后经多次加水煎煮、过滤、合并滤液并浓缩至特定浓度,冷藏备用,此方法确保有效成分提取,为后续实验提供稳定药物样本。

总抗氧化能力测定实验

40 只小鼠分正常对照组和桑黄高、中、低剂量组,连续灌胃 15 天,之后检测血清和肝脏相关指标,通过对比不同剂量组与正常对照组数据,分析桑黄对正常小鼠抗氧化能力的影响。

对 D - 半乳糖致小鼠氧化损伤影响实验

60 只小鼠分为正常对照组、模型组、维生素 E 组和桑黄高、中、低剂量组。除正常组外,其余组通过皮下注射 D - 半乳糖构建衰老模型,造模同时给药 42 天,末次给药后检测多项血液和肝组织氧化指标及肝组织蛋白表达,全面评估桑黄对衰老小鼠氧化损伤的作用及机制。

检测指标与方法

采用比色法测定肝脏及血清中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、总抗氧化能力(T - AOC)、过氧化酶(POD)等指标;运用 Western blot 技术检测肝脏中 Nrf2 和 HO - 1 蛋白表达,从酶活性和蛋白水平多维度探究桑黄的抗氧化效果。

统计分析

计量数据以均值±标准差表示,借助 SPSS 20.0 软件进行单因素方差分析,组间比较用 LSD 法,以 P

实验结果

对小鼠总抗氧化能力的影响

体质量和脏器指数

桑黄各剂量组小鼠体质量及肝脏、肾脏系数与正常对照组相比无显著差异,表明桑黄在实验剂量下对小鼠生长及主要脏器无明显不良影响,排除了因药物毒性或其他非抗氧化因素导致的脏器功能改变干扰。

血清氧化指标

在血清中,部分桑黄剂量组 MDA 含量较正常对照组升高,但 SOD 酶活力及 SOD/MDA 值无明显变化,说明桑黄对血清氧化指标的影响具有复杂性,并非单纯的线性关系,可能与体内复杂的代谢调节机制有关。

肝组织氧化指标

低、中剂量桑黄可显著提升小鼠肝组织 T - AOC 水平,高剂量增强 SOD 酶活力但同时升高 MDA 含量,总体显示 6g·kg⁻¹ 剂量对肝组织总抗氧化能力有一定促进作用,提示不同剂量桑黄在肝组织中的抗氧化作用方式和效果存在差异,可能与药物代谢及肝组织对药物的摄取、转化能力相关。

对 D - 半乳糖致小鼠氧化损伤的影响

体质量和脏器指数

实验各组小鼠体质量及肝脏、肾脏系数无明显差异,再次证实桑黄在衰老模型小鼠中也未引起明显的生长和脏器毒性反应,保证后续氧化损伤相关指标变化是由药物抗氧化作用而非其他因素所致。

血清氧化指标

模型组血清 MDA 和 GSH 显著高于正常对照组且 T - AOC 降低,而桑黄各剂量组可显著降低 MDA 和 GSH 含量、升高 T - AOC,表明桑黄能有效改善衰老模型小鼠血清氧化应激状态,减轻脂质过氧化损伤,增强机体抗氧化防御能力。

肝组织氧化指标

与正常对照组相比,模型组肝组织相关酶活力虽无统计学差异但呈下降趋势,桑黄低、中剂量组 POD 酶活力明显上升,中剂量组 T - AOC 和 SOD 酶活力在与模型组对比时也显著升高,进一步说明桑黄对衰老小鼠肝组织氧化损伤具有修复和保护作用,且不同剂量作用效果有所不同。

肝组织 Nrf2 和 HO - 1 蛋白表达

模型组小鼠肝脏 Nrf2 及 HO - 1 蛋白表达明显低于正常对照组,桑黄 6、12g·kg⁻¹ 剂量组可显著增加其表达,有力支持了桑黄抗氧化作用与调节 Nrf2/HO - 1 通路密切相关的假设,从分子机制层面揭示了桑黄抗氧化的内在机理。

结论

本研究表明桑黄水煎液可提高正常小鼠抗氧化能力,改善 D - 半乳糖致小鼠氧化损伤,其作用机制可能是通过调节 Nrf2/HO - 1 通路增强抗氧化酶活性、减少过氧化脂质生成。这一研究成果为桑黄在抗衰老及相关疾病防治领域的应用提供了重要理论依据,鉴于桑黄多种活性成分的复杂性,后续对其成分的深入研究将有助于进一步明确各成分在抗氧化过程中的具体作用及协同机制,推动桑黄在医药保健领域的开发利用。


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来源:千济方

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