磷酸化蛋白检测避坑全指南:从样品到 WB 的硬核操作手册
蛋白磷酸化作为信号通路研究的 "黄金指标",其检测堪称科研人必修的 "显微镜级" 技术活。Western blot 虽为常规手段,但磷酸化检测的特殊性,让每个环节都藏着 "翻车风险"。今天就来拆解这套 "高难度动作" 的正确打开方式 ——
蛋白磷酸化作为信号通路研究的 "黄金指标",其检测堪称科研人必修的 "显微镜级" 技术活。Western blot 虽为常规手段,但磷酸化检测的特殊性,让每个环节都藏着 "翻车风险"。今天就来拆解这套 "高难度动作" 的正确打开方式 ——
蛋白磷酸化是一种重要的蛋白质翻译后修饰(Post-translational modification, PTM),指的是在蛋白质的特定氨基酸残基上添加磷酸基团的过程。这一过程通常由一类称为蛋白激酶的酶催化,而去除磷酸基团则由磷酸酶催化。磷酸化主要发生在丝氨酸
蛋白翻译后修饰(PTM)通过在一个或多个氨基酸残基加上修饰基团,改变蛋白质的理化性质,影响蛋白质的空间构象、活性状态、亚细胞定位、蛋白互作等。PTM让单个蛋白质实现功能多样性,适应不同生理需求。PTM是细胞信号传递必不可少的元素,被称为细胞的“自然语言”。